DGH - Materiais de difusão da cultura científica e de formação
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Recent Submissions
- Diagnóstico Laboratorial de Porfirias - Pensar PorfiriaPublication . Ferreira, Filipa; Vilarinho, LauraMaterial informativo de sensibilização para pensar porfiria de apoio ao conhecimento e diagnóstico deste grupo de doenças raras. As porfirias são um grupo de oito doenças metabólicas raras, resultantes de diferentes deficiências enzimáticas na biossíntese do grupo heme.
- SOP9 Buccal Cells Sampling - Partnership for the Assessment of the Risks from ChemicalsPublication . Louro, Henriqueta; Silva, Maria JoãoSOP9 Buccal Cells Sampling - presentation for PARC Training for Waste Management Survey / Partnership for the Assessment of the Risks from Chemicals. Aim of presentation: Provide the general procedure for the collection, storage, and transfer of buccal cell samples for micronucleus analysis in exfoliated buccal cells. The buccal micronucleus assay is a minimally invasive approach for measuring DNA damage, cell proliferation, cell differentiation and cell death in exfoliated buccal cells (Bolognesi et al., 2015). It offers a great opportunity to evaluate in a clear and precise way the appearance of genetic damage whether it is present as a consequence of occupational or environmental risk, being reliable, fast, relatively simple, cheap, and minimally invasive and causes no pain. This Standard Operating Procedure (SOP) for buccal cells sampling is intended to be used in the PARC waste management survey. The SOP provides the general procedure for the collection, storage, and transfer of buccal cell samples.
- SOP3 Blood Sampling - Partnership for the Assessment of the Risks from ChemicalsPublication . Silva, Maria João; Henriqueta LouroSOP3 Blood Sampling - presentation for PARC Training for Waste Management Survey. Aim of the presentation: Training dedicated to introduce contents of SOP for blood sampling, transport and storage, to ensure its correct implementation during the waste management occupational study. This Standard Operating Procedure (SOP) for blood sampling provides the general procedure for the collection, storage and transfer of human blood samples to be analysed within the e-waste occupational study under HBM4EU and is based on a SOP developed within a previous occupational study.
- Caracterização molecular de hemoglobinopatias na população portuguesa: um subestudo do projeto INSEFPublication . Santos, Daniela; Barreto, Marta; Kislaya, Irina; Lopes, Pedro; Mendonça, Joana; Machado, Miguel P.; Vieira, Luís; Dias, Carlos; Faustino, PaulaA anemia é um problema de saúde pública a nível mundial que ocorre quando o número de glóbulos vermelhos em circulação ou a sua capacidade de transporte de oxigénio é insuficiente para atender às necessidades do organismo. A anemia pode ter uma origem ambiental, por exemplo devido a carência nutricional em ferro, ou uma origem genética, onde se enquadram as anemias hereditárias originadas por alterações nos genes codificantes das cadeias globínicas da hemoglobina. Estas anemias hereditárias são denominadas por hemoglobinopatias, têm transmissão autossómica recessiva e incluem as talassémias e as variantes da hemoglobina. As talassémias, no estado de portador, apresentam-se geralmente associadas a um fenótipo hematológico de microcitose e/ou hipocromia e, eventualmente, anemia. Tendo em conta os movimentos migratórios recentes, sobretudo dos continentes africano e sul americano para a Europa, o padrão de distribuição destas patologias nalguns países da Europa tem-se alterado. Os últimos estudos de prevalência de hemoglobinopatias efetuados em Portugal foram realizados há mais de duas décadas. Assim, este trabalho teve como principal objetivo contribuir para o conhecimento mais recente das hemoglobinopatias em Portugal, sobretudo das talassémias. Para concretizar este objetivo foram analisados os participantes no estudo epidemiológico Inquérito Nacional de Saúde com Exame Físico (INSEF)* que constituem uma amostragem da população residente em Portugal, continental e ilhas, em 2015. Em 4808 participantes no INSEF foi caracterizado o fenótipo hematológico e naqueles que apresentaram hipocromia e/ou microcitose (n = 204) foram analisados os genes da β-globina (HBB) e da α-globina (HBA2 e HBA1). A pesquisa de deleções/inserções no agrupamento génico da α-globina foi efetuada por Gap-PCR e Multiplex Ligation-Dependent Probe Amplification (MLPA). O gene HBB foi estudado através de PCR-longo seguido de Next-Generation Sequencing (NGS). As variantes detetadas por NGS foram avaliadas in silico através das ferramentas bioinformáticas PolyPhen-2, Sorting Intolerant From Tolerant (SIFT) e varSEAK, de modo a analisar o seu impacto ao nível da estrutura e função da respetiva proteína e ao nível do splicing. As variantes consideradas patogénicas ou possivelmente patogénicas foram confirmadas por sequenciação de Sanger. Identificámos a presença da deleção α-talassémica de 3,7 kb em 53 indivíduos, da deleção de 4,2 kb em 1 indivíduo e ainda, em 2 indivíduos, a presença dos genes da α-globina triplicados. Relativamente ao estudo do gene HBB, foram identificadas 10 variantes genéticas diferentes, patogénicas ou possivelmente patogénicas, em 22 indivíduos, sendo que 7 tipos diferentes de mutações são responsáveis por β-talassémia [vulgarmente conhecidas por Cd39 (C>T), IVS-I-6 (T>C), IVS-I-110 (G>A), IVS-I-1 (G>A), Cd15 (G>A), Cd6(-A) e Cd41/42 (-CTTT)] e 3 por variantes de hemoglobina (Hb S, Hb C e Hb D-Portugal). Obtivemos neste subgrupo da população INSEF com fenótipo hematológico anómalo (n = 204) uma frequência de 26,6% para a α-talassémia, 10,8% para a β-talassémia e 1,5% para variantes de hemoglobina. Assim, os nossos resultados revelaram que 37,7% destes casos sintomáticos têm uma origem genética – uma hemoglobinopatia. Uma vez que, salvo raríssimas exceções, os portadores de β-talassémia apresentam o fenótipo de microcitose e hipocromia, os nossos resultados permitem sugerir uma prevalência geral de 0,5% de portadores de β-talassémia para a população residente em Portugal continental e ilhas em 2015. Este valor é semelhante ao anteriormente descrito para Portugal continental (Martins et al, J Med Genet, 1993, 30:235). A mesma extrapolação não poderá ser realizada para determinar a prevalência de α-talassémia uma vez que sabemos que uma proporção significativa destes portadores não manifesta qualquer alteração hematológica. Quanto às variantes de hemoglobina, uma vez que na grande maioria não afetam os índices hematimétricos, os 3 casos detetado justificam-se pela co-herança com α-talassémia ou da co-existência de anemia ferropénica. Assim, a determinação da prevalência de variantes de hemoglobina bastante importantes, como seja a Drepanocitose (presença de hemoglobina S), requerem outro tipo de abordagem metodológica. Observámos, ainda, que dos 204 indivíduos com microcitose e/ou hipocromia, 76 também apresentavam anemia. Contudo, no inquérito INSEF de autorreporte apenas 2 desses indivíduos referiram ter conhecimento desta condição. Para além disso, verificámos que grande maioria dos portadores de hemoglobinopatia detetados perceciona a sua saúde como sendo normal e, eventualmente, desconhece (não declarou ter conhecimento) de que é portador de uma doença genética. Este estudo permitiu-nos concluir que as α- e as β-talassémias, no seu estado de heterozigotia, são responsáveis por uma fração considerável dos fenótipos de microcitose e/ou hipocromia, acompanhados ou não de anemia, na população residente no nosso país. Para além disso, os nossos resultados apontam para a necessidade de sensibilização dos médicos de Medicina Geral e Familiar para estas patologias e para o reforço das estratégias de deteção, de informação e de acompanhamento dos portadores de uma hemoglobinopatia em Portugal.
- Modulação genética da gravidade da anemia hemolítica e de eventos clínicos adversos em crianças Angolanas com Anemia das Células FalciformesPublication . Germano, Isabel; Santos, Brígida; Delgadinho, Mariana; Ginete, Catarina; Miranda, Armandina; Lopes, Pedro; Arez, Ana Paula; Brito, Miguel; Faustino, PaulaA anemia das células falciformes (SCA), ou drepanocitose, é uma doença genética recessiva causada pela mutação c.20A>T no gene da beta-globina (HBB), caracterizada pela presença de eritrócitos falciformes, anemia hemolítica crónica e eventos vaso-oclusivos, entre outros. As manifestações clínicas da doença são muito heterogéneas devido a agentes modificadores ambientais e genéticos. Neste estudo pretendeu-se investigar modificadores genéticos da SCA numa população pediátrica Angolana, onde a doença é um grave problema de saúde pública. O estudo incidiu sobre 200 crianças residentes em Luanda ou Caxito, com idades entre os 3 e 12 anos, com SCA. Todos os participantes beneficiaram de acompanhamento por uma pediatra que compilou os respetivos fenótipos hematológicos, bioquímicos e clínicos. Foram estudadas treze regiões polimórficas em genes associados à adesão das células sanguíneas ao endotélio vascular (VCAM1 e CD36), tónus vascular (NOS3) e hemoglobinização dos eritrócitos (HBA), através de PCR, RFLP, Gap-PCR e sequenciação de Sanger. Os resultados revelaram uma elevada prevalência (67,5%) de α-talassémia (deleção 3,7 kb em HBA), associada a menor gravidade da SCA, pois retarda a idade da primeira manifestação, diminui a anemia, diminui o grau de hemólise e o número de transfusões sanguíneas por ano. Para além disso, a co-herança de α-talassémia diminui o número de eventos clínicos adversos, tais como, AVC, osteomielite, esplenomegália e hepatomegália. Considerando os resultados relacionados com as moléculas de adesão, dois SNPs em CD36 (rs1984112 e rs1413661) mostraram ter influência na gravidade da anemia. Os genótipos contendo o alelo C do rs1413661 revelaram ser fatores de risco para a anemia grave, pois foram associados a menores níveis de hemoglobina e maior número de hospitalizações e transfusões sanguíneas por ano de vida. Por outro lado, o alelo C do rs1041163 de VCAM1 foi associado a menores níveis séricos da lactato desidrogenase (LDH), um biomarcador da hemólise intravascular. Atendendo ao metabolismo do óxido nítrico, o alelo C do rs2070744 em NOS3 foi associado a elevados níveis de LDH e a um maior número de hospitalizações, sendo um possível fator de risco de agravamento da hemólise. Este trabalho contribuiu para aprofundar o conhecimento da fisiopatologia da SCA em Angola, confirmando o benefício da co-herança da α-talassémia e reforçando a importância do metabolismo do óxido nítrico e da adesão celular na variabilidade da doença. Neste âmbito, chamamos a atenção para a molécula de adesão CD36 que se expressa à superfície dos reticulócitos e eritrócitos destes doentes, e cujo respetivo gene, quando afetado pela variante C em rs1413661, foi aqui, pela primeira vez, observada afetando a gravidade da anemia e as suas correspondentes consequências clínicas na SCA. As moléculas mediadoras da adesão das células sanguíneas ao endotélio vascular são potenciais alvos farmacológicos a usar numa medicina personalizada para amenizar algumas complicações da SCA.
- HBM4EU - Mycotoxins: video disseminationPublication . Alvito, Paula; Viegas, Susana; Silva, Maria JoãoVídeo de disseminação do HBM4EU sobre micotoxinas, efeitos na saúde humana, legislação e exposição humana
- Micotoxinas, o que precisa saberPublication . Alvito, Paula; Viegas, Susana; Silva, Maria JoãoInfográfico sobre micotoxinas desenvolvido no âmbito do projeto HBM4EU. HBM4EU is a joint effort of 30 countries, the European Environment Agency and the European Commission.
- Princípios básicos de genotoxicidade e carcinogénesePublication . Louro, Henriqueta; Ventura, Célia; Tavares, Ana M.; Rolo, Dora; Pinto, Fátima; Silva, Maria JoãoA Toxicologia Genética estuda os efeitos adversos de xenobióticos ao nível do genoma dos organismos vivos, procurando compreender a interação gene-ambiente e suas consequências para a saúde humana. O presente curso irá proporcionar aos formandos uma introdução aos conceitos essenciais e às metodologias usadas na área da Toxicologia Genética.
- Oral Exposure to Titanium dioxide nanoparticles: a Systematic Literature Review as a tool to develop Adverse Outcome Pathway landscapes and supporting in vitro assaysPublication . Rolo, Dora; Silva, Maria João; Louro, HenriquetaDespite being considered key enabling technologies, the exponential use of nanoparticles in food technology leads to concerns about adverse health outcomes upon ingestion. The use of Titanium dioxide nanoparticles (TiO2-NPs) as a food additive was considered no longer safe by the European Food Safety Authority (EFSA) in 2022, and the European Commission announced the decision to ban its use. Nevertheless, other products containing TiO2-NPs, such as pharmaceuticals, personal hygiene, or cosmetics, that are not covered in the food regulation, may lead to ingestion of TiO2-NPs. In this regard, further research is needed. A valuable tool is the establishment of Adverse Outcome Pathways (AOPs) landscapes, which contributes to support risk assessment and may drive policy decisions. AOPs describes a sequence of causally linked events at different levels of biological organization leading to adverse health effects. Our main goal was to further understand the molecular and cellular mechanisms, triggered after the ingestion of TiO2-NPs. A systematic literature review was performed, integrating information produced on this topic and provide data for a standardized assessment of the evidence. AOP landscapes were proposed in order to identify mechanisms that mediate adverse outcomes, and additional in vitro assays were performed. Our in vitro findings suggest that part of the ingested TiO2-NPs can be transcytosed through colonic epithelia without disrupting intestinal barrier integrity. These results are consistent with our AOPs proposal where colorectal cancer, liver injury, reproductive toxicity, cardiac and kidney damage, as well as hematological effects stand out as possible adverse outcomes. Based on a mechanistic reasoning, this study contributes to increase the understanding of ingested TiO2-NPs kinetics, their bioavailabity to induce systemic effects crossing the intestinal barrier and potential fate in Humans. Overall, the findings further support a limitation of the use of TiO2-NPs in food, as announced by EFSA.
- Transepithelial Electrical Resistance (TEER) measurement. Virtual Lab videoPublication . Rolo, Dora; Pinto, Fátima; Vital, Nádia; Ventura, Célia; Moreira, Rodrigo; Cadete, João; Louro, Henriqueta; Silva, Maria JoãoTransepithelial Electrical Resistance (TEER) measurement. Virtual Lab video.