DDI - Dissertações de mestrado
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- Estudo de dois membros da familia das proteínas da membrana externa de Helicobacter pylori, homC e homDPublication . Cordeiro, Rita; Oleastro, Mónica; Ramirez, MárioNeste trabalho pretendeu se estudar a diversidade genética e evolução dos genes homC e homD, que codificam para OMPs de H. pylori, num painel de 192 estirpes isoladas de doentes de origem geográfica diferente e com diversas gastropatologias. Foram utilizadas as técnicas de PCR, sequenciação e ferramentas de bioinformática. Posteriormente, pretendeu se esclarecer o papel destes genes na virulência de H. pylori, através de ensaios in vitro e avaliação da antigenicidade das respectivas proteínas. A reconstrução filogenética do gene homC revelou uma segregação geográfica, com três grupos predominantes, Ocidental, Oriental/Ameríndio e Africano. Foram identificadas oito variantes alélicas, com especificidade geográfica nos alelos mais prevalentes. Os resultados sugerem que estas variantes podem estar envolvidas na adaptação da bactéria ao hospedeiro e constituir marcadores da patologia gástrica e da virulência da estirpe. O gene homD mostrou menor diversidade genómica. No entanto, no terminal N das proteínas HomD foi observada uma zona variável de repetições de motivos de KP (2 9 KP), tendo se verificado uma correlação entre um menor número de repetições de motivos KP (≤4 KP) e a UP e o maior número de repetições (≤7 KP) e a gastrite. A análise in silico da proteína HomD mostrou que esta região de repetições exibe um elevado índice de hidrofibicidade e antigenicidade e uma alta probabilidade de exposição à superfície da bactéria. A corroborar estes resultados, demonstrou se que a proteína HomD é antigénica. Os ensaios in vitro sugerem que o gene homC poderá estar envolvido na resposta inflamatória de H. pylori. Globalmente, os resultados obtidos neste estudo sugerem que o gene homC está implicado na interacção entre H. pylori e o hospedeiro, contribuindo para a virulência desta bactéria. O gene homD parece ser um importante antigénio de H. pylori, e devido à sua elevada conservação a nível mundial, poderá constituir um novo alvo vacinal ou terapêutico.
- Desenvolvimento de um ensaio para genotipagem do vírus da Hepatite C numa população de infectados em ambiente prisionalPublication . Avó, Ana Patricia; Pádua, Elizabeth; Crespo, Ana[PT] O vírus da hepatite C (VHC) é caracterizado por uma elevada variabilidade genética traduzida na sua classificação em 6 diferentes genótipos, e em mais de 80 subtipos com distintos padrões de distribuição epidemiológica no mundo. Os vários genótipos estão associados a uma diferente evolução da infecção e progressão da doença, sendo por isso a classificação do VHC a principal ferramenta do clínico para a determinação da dosagem e duração do tratamento dos doentes. O presente estudo pretendeu desenvolver um método alternativo de genotipagem e subtipagem do VHC, no contexto de um laboratório de referência, que permitisse por um lado, reduzir os custos, e por outro lado, obter uma melhoria na classificação do vírus. No presente trabalho foram analisadas amostras de referência e amostras clínicas de 72 reclusos infectados por VHC, com resultados previamente conhecidos dos níveis de RNA e de genotipagem obtidos pelo método comercial LiPA. As amostras foram sujeitas a extracção de RNA e síntese de cDNA, amplificação por heminested PCR e sequenciação, e ainda, a análise filogenética de sequências nucleotídicas das regiões C/E1 e NS5B do VHC. Os resultados foram comparados com os previamente conhecidos obtidos pelo método LiPA. Independentemente das regiões genómicas, a subtipagem do VHC pelo método desenvolvido foi conseguida em 95,8% (69/72) dos casos, uma proporção bastante superior comparativamente à obtida no método LiPA (47,2%, 34/72), mostrando assim um melhor desempenho em identificar ou discriminar o subtipo VHC. Informação molecular conjunta para as duas regiões genómicas foi obtida em 88,9% (64/72) dos casos com identificação de um recombinante intergenótipo 1b/2k e um recombinante intragenótipo 2q/2k para a região C/E1 e 2k/2a para a região NS5B. Adicionalmente, 2 casos apresentaram uma classificação de VHC discordante, 1b/4a e 3a/4a, respectivamente para as regiões C/E1 e NS5B analisadas. Contudo, nestes casos não foi possível descartar a hipótese de possíveis infecções mistas. O elevado desempenho do método desenvolvido na detecção e classificação do VHC pode possibilitar de um modo mais preciso uma correlação clínica com os subtipos virais do VHC, e deste modo viabilizar um melhor entendimento do papel da variabilidade genómica na história natural e progressão da infecção do VHC.
- Validação de um algoritmo para identificação de Mycobacterium spp. no diagnóstico laboratorialPublication . João, Inês; Jordão, Luisa; Hänscheid, ThomasThe last decade of the 20th century was marked by the appearance of the HIV pandemic. Together with this plague came not only the resurgence of tuberculosis but also the appearance of opportunistic infections due to nontuberculous mycobacteria (NTM) mainly by members of Mycobacterium avium complex (MAC). Later on these opportunistic infections were also often described in other groups of patients (e.g., organ transplanted and oncologic patients), which shared a compromised immune system. Concurrently, the number of NTM recognized as potential ethological agents of human diseases increased. Among these we highlight M. kansasii, M. abcessus, M. chelonae, M. malmoense and M. xenopi. Currently, NTM infections are an important health care problem, affecting both immunodepressed and immunocompetent individuals, with difficult diagnose and treatment since NTM are highly resistant to the available drugs. This fact lead us to a paradoxical situation in which microorganisms rated as level 1 and 2, based on biohazard classification, represent a threat similar to Mycobacterium tuberculosis multidrug resistant strains. The first step to overcome this problem is the implementation of fast and efficient diagnosis methods. This will enable the physician to diagnose and rapidly implement a therapeutical scheme in order to treat the patient and prevent the spread of the disease within the community. The present work intends to be a step forward to the achievement of this goal. In the present work 54 NTM strains from the INSA, Infection Diseases Department bacterial collection (years 2008-2009) were identified at least by two molecular biology methods following accepted guidelines. The results rendered by three different methods (PRA-hsp65, 16S rRNA and hsp65 sequention) were compared in order to analyze their performance in NTM identification. The main conclusion drawn from this work is that the correct identification of a NTM can only be achieved by the combination of at least two different methods. Usually is necessary to combine genotyping methods with the analysis of key phenotypic characteristics.
- Desenvolvimento de uma técnica de PCR em Tempo Real para deteção do Vírus da Imunodeficiência Humana Tipo 1Publication . Almeida, Vanessa; Pádua, Elizabeth; Crespo, Ana[PT] As crianças verticalmente infetadas por VIH-1 têm elevado risco de progressão para SIDA nos primeiros anos de vida. Por um lado, este facto evidencia a importância do diagnóstico precoce da infeção permitindo tratamento atempado, e por outro lado, fundamenta ainda a procura constante da melhoria dos ensaios experimentais de diagnóstico. A técnica de nested PCR implementada no laboratório para diagnóstico precoce é sensível e específica, mas obriga a uma manipulação de produtos amplificados com maior risco da ocorrência de contaminações. É também considerado um método moroso já que associa a duas reações de amplificação sequenciais uma eletroforese em gel de agarose para deteção dos produtos amplificados. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um ensaio experimental sensível e específico, alternativo à técnica de nested PCR, que pudesse conduzir à obtenção de ganhos no tempo de saída de resultados e na redução do risco de ocorrência de contaminações. Diferentes ensaios experimentais de PCR em Tempo Real foram desenvolvidos para a amplificação de fragmentos do VIH-1 (região LTR e pol) e efetuada uma avaliação prévia de resultados com a utilização de 3 grupos de amostras de referência: amostras positivas (n=15), amostras com ADN VIH-1 quantificado (n=8) e amostras negativas (n=11, positivas para VIH-2). Nos ensaios, foram diretamente testadas amostras de ADN viral extraído de CMSP ou sintetizado a partir de plasma, e também, amostras correspondentes a produtos de PCR gerados por uma prévia amplificação do ADN através de PCR Convencional. Foi selecionado o algoritmo experimental que revelou melhor desempenho na deteção da infeção VIH-1 para análise de amostras clinicas. Estas amostras foram obtidas entre 2009 e 2011, e correspondem a amostras colhidas a mães infetadas (positivas VIH-1, n=149) e a filhos em que não ocorreu a transmissão do vírus (amostras negativas, n=20). O algoritmo experimental em Tempo Real escolhido correspondeu à amplificação de fragmentos de VIH-1 (região LTR) utilizando a combinação dos primers HL456N e HL602C com a sonda TaqMan SHL478N, a partir de amostras de ADN previamente submetidas a PCR Convencional com os primers externos HL456N e HL650C. Em resultado da prévia avaliação com amostras de referência, este algoritmo revelou sensibilidade de 86,7% e um limite de deteção ADN VIH-1 de 0,8 cópias/amostra. Com amostras clínicas foi obtida uma sensibilidade de 75,2 % e de especificidade de 100%. A confirmação da infeção com primeiras e segundas amostras foi conseguida em 87,5% dos casos (112 casos positivos entre 128 estudados). Foi também obtido um valor de Kappa de 0,417 que mostrou uma concordância moderada entre resultados esperados e obtidos. Comparativamente, na técnica de nested PCR eram conhecidos valores de sensibilidade e especificidade respetivamente de 81,9% e 100% e uma concordância estimada pelo valor de Kappa de 0,565. A confirmação dos casos de infeção com primeiras e segundas amostras foi conseguida em 95,3% dos casos (122 casos positivos entre 128 estudados). Embora se tenha conseguido informação útil e obtido ganhos em tempo através do algoritmo experimental desenvolvido, este apresenta sensibilidade inferior à técnica de nested PCR utilizada no laboratório. Deste modo, para além do aumento da população/amostras em estudo, que se concluiu ser necessário para melhor tratamento estatístico dos resultados, será também essencial um incremento da sensibilidade dos ensaios que poderá ser obtido explorando outras regiões genómicas alvo alternativas às utilizadas no presente estudo.
- Mecanismos de resistência aos antibióticos em bactérias de Gram negativo com susceptibilidade diminuida aos carbapenemes: caracterização laboratorialPublication . Simões, Constança; Caniça, Manuela; Dias, DeodáliaOs carbapenemes são antibióticos β-lactâmicos utilizados como último recurso no tratamento de infeções causadas por bactérias de Gram negativo. Considerando a emergência da resistência a estes antibióticos, importa esclarecer os mecanismos que estão na origem desta diminuição de suscetibilidade. Deste modo, o presente trabalho teve como objetivo caracterizar, laboratorialmente, os mecanismos responsáveis pela resistência aos carbapenemes em isolados clínicos de Gram negativo, a sua multirresistência, e as vias implicadas na possível disseminação dessa resistência. Dos 426 isolados estudados, foram identificados 22 (5%) com suscetibilidade diminuída ao ertapeneme, os quais foram retidos para a restante investigação. Assim, com os testes de suscetibilidade aos antibióticos realizados, verificou-se que 4% dos isolados apresentavam multirresistência aos antibióticos, tendo ainda permitido predizer mecanismos de resistência responsáveis pelos fenótipos encontrados, e orientar os estudos bioquímicos e moleculares. Estas duas últimas abordagens metodológicas identificaram e caraterizaram a expressão de carbapenemases (3 KPC- 3 e 1 GES-5) e/ou a expressão de β-lactamases de espectro alargado (ESBL) ou AmpC (MIR-tipo). Em 21 isolados foi identificada a alteração aminoacídica das principais porinas (por inserção, deleção e/ou substituição): OmpK35, OmpK36, OmpK37 (Klebsiella pneumoniae), OmpC, OmpF (Escherichia coli, Enterobacter cloacae e Enterobacter cancerogenus), Omp35 e Omp36 (Enterobacter aerogenes). A ESBL predominante foi a β-lactamase CTX-M-15 (n=11) em co-expressão com OXA-1 e TEM-1, bem como a enzima Aac(6’)-Ib-cr (n=8) e OqxAB (n=5); um isolado coexpressava a ESBL SHV-12 e GES-5. Foram identificadas outras β-lactamases, como SHV-1, SHV-11 e SHV-32. Se E. coli pertencia à sequência tipo ST131, estirpe pandémica, já K. pneumoniae apresentou diversidade genética, destacando-se 2 isolados com ST147, disseminado em vários países, e o novo ST1138. Globalmente, este estudo dá um contributo muito importante para o conhecimento dos mecanismos envolvidos na resistência aos carbapenemes (cuja disseminação clonal e horizontal é preocupante), nomeadamente em isolados com multirresistência, realçando-se a resistência plasmídica às fluoroquinolonas.
- Caracterização dos mecanismos de resistência à ampicilina em estirpes clínicas de Haemophilus influenzae isoladas em Portugal entre o período de 2009 a 2012Publication . Barrulas Guilherme, Elsa; Lavado, Maria Paula Bajanca; Dias, Deodália Maria Antunes[PT] O Haemophilus influenzae (H. Influenzae) é uma bactéria Gram-negativa restrita ao aparelho respiratório humano, normalmente responsável por infeções respiratórias adquiridas na comunidade. A gravidade destas infeções resulta inicialmente num diagnóstico presuntivo, sendo posteriormente estabelecido um tratamento antibiótico empírico. A resistência desta bactéria aos antibióticos β-lactâmicos pode constituir sérias implicações a nível clínico, sendo que, o uso inapropriado destes antibióticos e a utilização de antibióticos de largo espectro têm contribuído grandemente para a emergência da resistência a esta classe de antibióticos. A resistência à ampicilina pode ser mediada por dois mecanismos: a produção de enzima β-lactamase, responsável pela inativação enzimática dos antibióticos β-lactâmicos, e pela presença de proteínas de ligação à penicilina alteradas que se traduz numa diminuição da afinidade aos mesmos. A amostra de 248 estirpes clínicas de H. influenzae foi selecionada com base na concentração inibitória mínima (CIM) à ampicilina, tendo como objetivo a caracterização dos mecanismos de resistência aos antibióticos β-lactâmicos em estirpes clínicas isoladas em Portugal. Foram estudadas 140 estirpes não produtoras de β-lactamase com CIM à ampicilina ≥1mg/L, 66 estirpes produtoras de β-lactamase com CIM≥8mg/L, e ainda um grupo controlo de 42 estirpes suscetíveis com CIM1mg/L. A sequência do gene ftsI foi amplificada e sequenciada para todas as estirpes. Da totalidade, 204 estirpes apresentavam mutações na região da transpeptidase do gene ftsI, nomeadamente 136 gBLNAR de 140 estirpes BLNAR, 24 gBLNAR de 42 estirpes BLNAS e 44 gBLPACR de 66 estirpes BLPAR. Foram identificados 40 padrões mutacionais que foram incluídos em grupos e subgrupos previamente descritos (I, IIa, IIb, IIc, IId e III-like). A análise destes padrões permitiu a classificação da maioria das estirpes no grupo mutacional II (78,5%), e as substituições aminoacídicas mais frequentes situavam-se próximo do domínio KTG: Val547Ile (88,7%), Asn526Lys (76,9%) e Asn569Ser (72,6%). A relação entre as mutações identificadas e os níveis de suscetibilidade à ampicilina permitiu constatar que 8,8% das estirpes eram suscetíveis, 8,8% eram resistentes devido à produção de β-lactamase (BLPAR), 64,5% eram resistentes pela alteração das PBPs, e 17,7% apresentavam ambos os mecanismos de resistência (BLPACR). Comparando estes resultados com os resultados obtido no período 2001-2008, verificou-se um aumento do número de estirpes suscetíveis à ampicilina, e também do número de estirpes resistentes com mutações no gene ftsI. Pela caracterização das estirpes e relação clonal entre as estirpes BLNAR e BLPACR por Multilocus Sequence Typing (MLST), verificou-se que as estirpes BLNAR apresentam uma grande heterogeneidade genética e que as estirpes BLPACR também não aparentam ter uma grande proximidade filogenética entre si.
- Hospital acquired infections: Biofilm assembly and increased antibiotic resistance of microorganismsPublication . Bandeira, Maria; Martins, Raúl Daniel Carneiro Lavado; Jordão, Luísa[ENG] Healthcare-associated infections (HAI) are a public health threat. The etiological agents responsible for these infections are diverse and, in the case of bacteria, often resistant to antibiotics. Bacteria are able to assemble biofilm persisting in healthcare units, becoming more resistant to antibiotic and being responsible for HAIs onset and spread. Bacteria isolated from samples collected in hospitals fulfilling the criteria of HAI were used. The selected bacteria comprise classical (Klebsiella pneumoniae) and emergent agents of HAI (Nontuberculous mycobacteria: NTM). The bacterial ability to assemble biofilm on cell culture plates was evaluated by the microtiter plate test. The structural features of bacteria (planktonic and biofilms)were accessed using scanning electron microscopy (SEM). Biofilms assembled on the model surface(cell culture plate) and on abiotic surfaces present in healthcare units (e.g. silicon) were characterized. For K. pneumoniae strains the ability to assemble biofilms on biotic surfaces (HeLa cells) was also evaluated. The SEM analysis allowed the identification of differences between planktonic and sessile bacteria that can be related to increased virulence. The results showed that biofilm assembly depends on bacteria and abiotic surface. On biotic surfaces, the biofilm assembly is dependent on tropism relations between bacteria and the host. For NTM biofilm was possible to identify factors involved in biofilm assembly: sliding and membrane charges. In the case of K.pneumoniae this relation was not establish. Nevertheless, it was possible to establish a link between the ability to assemble biofilm and increased antibiotic resistance. Altogether these data revealed a relation between biofilm assembly,antibiotic resistance and spread of HAIs.
- Estudo molecular de estirpes de Aspergillus fumigatus isolados em aviários e em aves diagnosticadas com aspergilose. Possíveis implicações na Saúde PúblicaPublication . Valente, Joana Rita dos Santos; Sabino, Raquel; Leitão, Ana[PT] Aspergillus fumigatus é um agente etiológico fúngico disperso mundialmente por variados nichos ecológicos e o fungo patogénico que mais promove doenças respiratórias em aves e pessoas imunocomprometidas. A exposição a conídios deste fungo pode causar aspergilose invasiva, a doença mais frequente em variadas espécies ornitológicas, com elevada mortalidade e morbidade. Além disso, esta doença é um dos fatores que mais contribui para significativas perdas económicas na indústria avícola, bem como perdas de biodiversidade, em espécies selvagens. Neste contexto, Aspergillus fumigatus, que pertence ao complexo Fumigati, desenvolve-se facilmente no trato respiratório de aves e humanos, no solo, nas camas e ninhos das aves. Tem uma fácil aerolização e contamina os alimentos nos ambientes avícolas e produz uma micotoxina, gliotoxina, que invade o trato respiratório e é considerada como fator de virulência. A identificação exacta dos isolados fúngicos provenientes de aves é muito importante, para percepção da sua epidemiologia em aves, para pesquisa de espécies crípticas de Aspergillus fumigatus, que podem desencadear as mesmas patologias mas apresentar diferentes resultados às mesmas terapêuticas antifúngicas. A análise molecular efectuada neste estudo permitiu atingir estes objectivos. Como tal, 108 isolados provenientes de diversificadas aves foram analisados por ferramentas moleculares para determinar a presença de espécies crípticas de Aspergillus fumigatus e observar os seus diferentes perfis de susceptibilidade antifúngica ao itraconazol. Não foram detectadas espécies crípticas, mas foi possível corrigir duas identificações morfológicas erradas ao nível do complexo. Apesar da emergência da resistência adquirida por Aspergillus fumigatus ao itraconazol, estar a emergir, não foram detectadas estirpes resistentes neste estudo. O conhecimento molecular deste agente etiológico responsável pela aspergilose invasiva em aves é importante para auxiliar a escolha de uma melhor terapêutica e futuros tratamentos para infeções oportunistas fúngicas, contribuindo assim para menos perdas na produção avícola e para uma melhoria da Saúde Pública.
- Estudo do papel da imunidade inata nas infeções por micobactériasPublication . Sousa, Sara; Jordão, Luísa; Telhada, Maria Margarida Blasques[PT] Desde os primórdios da humanidade que existem relatos de infecções respiratórias causadas por micobactérias. A incidência de infecções por Micobactérias Não-Tuberculosas (MNT), consideradas oportunistas, tem aumentado gradualmente atingindo sobretudo a população imunodeprimida. As MNTs são maioritariamente ambientais e ubíquas. Sendo o difícil diagnóstico, a resistência aos antibióticos e o escasso conhecimento da patogenicidade destas micobactérias, os principais impulsores do seu estudo. Os macrófagos alveolares, em infecções do sistema respiratório, são as primeiras células do sistema imunitário que contactam com as MNTs. Estes irão desencadear de imediato uma resposta imunitária inata. Este trabalho teve como principal objectivo avaliar a resposta imunitária durante uma infecção com MNTs utilizando células THP-1 como modelo de macrófagos alveolares humanos. Para tal, foi avaliada a sobrevivência de algumas MNTs no interior dos macrófagos, seguida do estudo de vários componentes da resposta imunitária: maturação do fagossoma; produção de molécula pró- inflamatórias; e indução da morte celular. Foi possível observar a existência de 3 perfis de persistência intracelular: M. smegmatis é eliminado; M. fortuitum ATCC6841 apresenta um perfil de latência; o M. fortuitum 747/08, M. abscessus 549/08, M. avium ATCC25291 e M.avium 60/08 apresentam um perfil de crescimento. A maturação dos fagossomas de MNT é bloqueada duma forma menos eficiente do que a dos fagossomas de M. tuberculosis. Apenas o M. avium 60/08 foi capaz de induzir a produção de NO e IL-10. E ainda que existe a indução da apoptose diferenciada entre as estirpes estudadas, sendo o M. avium 60/08 o melhor indutor.
- Caracterização dos mecanismos de resistência aos antibióticos em estirpes de origem humana, ambientes associados aos cuidados de saúde e veterináriaPublication . Salgueiro, Vanessa; Caniça, Manuela; Rebelo, Maria TeresaA resistência aos antibióticos é atualmente um problema de saúde pública a nível mundial. Este fenómeno envolve diversos mecanismos e espécies bacterianas, revelando-se de extrema importância a sua compreensão, através de investigação e vigilância, para evitar possíveis disseminações. Neste âmbito, este trabalho teve como principal objetivo a caracterização de mecanismos de resistência aos antibióticos em 139 estirpes bacterianas com três origens distintas: hospitais (Acinetobacter baumannii, Exiguobacterium acetylicum, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Staphylococcus capitis e Staphylococ-cus epidermidis), ambiente de instituições de cuidados continuados (Acinetobacter haemolyticus, Acinetobacter lwoffii, Acinetobacter junii, Acinetobacter pittii, Klebsiella oxyto-ca, Micrococcus luteus, Pantoea spp., Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas oryzihabi-tans, Pseudomonas putida, Sphingomonas paucimobilis, S. capitis, Staphylococcus capi-tis/caprae/warneri, S. epidermidis, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis e Staphylococcus xylosos) e animais (S. aureus e Staphylococcus simiae). A realização de testes de suscetibilidade aos antibióticos (difusão em disco e E-teste) permitiu não só a identificação de estirpes com suscetibilidade diminuída às várias classes de antibióticos ensaiadas, mas também a orientação da pesquisa de genes de resistência por PCR (Polymerase Chain Reaction). Procurou-se estudar a diversidade genética das es-tirpes de A. baumannii através da deteção de linhagens clonais com importância internacio-nal e MLST (Multilocus Sequence Typing). No caso particular de S. aureus, a tipagem dos genes spa e agr, assim como MLST, permitiram estabelecer relações genéticas entre estas estirpes. Por outro lado, o método de PFGE (Pulsed-Field Gel Electrophoresis), utilizado para K. oxytoca, possibilitou a avaliação da clonalidade de uma estirpe ambiental em relação a estirpes de origem clínica. A maioria das estirpes coletadas em hospitais possuía um fenótipo de multirresistên-cia, ao contrário das estipes com origem nos lares e em animais. Aí se destaca a suscetibili-dade diminuída à ciprofloxacina e cefoxitina, esta última por expressão do gene mecA, em S. aureus e a suscetibilidade diminuída aos carbapenemes em A. baumannii e P. aerugino-sa, diminuindo as opções de tratamento disponíveis para infeções causadas por estas bactérias. Em A. baumannii foram encontrados os genes blaOXA-66 e blaOXA-23 e a sequência de inserção ISAba1. Em P. aeruginosa detetaram-se os genes blaGES-7-tipo, blaVEB-tipo, blaVIM-2 e blaVIM-11. A identificação do mesmo tipo de spa e ST em estirpes de S. aureus com origem humana e animal demonstra a possível disseminação entre estes dois reservatórios. A caracterização molecular permitiu ainda identificar uma eventual transferência de uma estirpe e/ou de determinantes de resistência entre S. capitis de um hospital e de um lar, situados na mesma área geográfica. Os lares e os animais, em paralelo com o Homem, poderão ser reservatórios de genes de resistência. Assim, é essencial um melhor conhecimento dos mecanismos de resistência e das vias de disseminação nestes reservatórios, para intervir e controlar a sua emergência e expansão.
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