Browsing by Author "Seuanes, Filomena"
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- Alfa-talassémia delecional e fenótipo hematológico: parâmetros associados às diferentes deleções na casuística de 2015 a 2019Publication . Gaspar, Gisela; Ramalho, Rita de Mira; Seuanes, Filomena; Feliciano, Carla; Duarte, Guida; Copeto, Sandra; Costa, Alcina; Santos, João Xavier; Miranda, ArmandinaAs talassémias são caracterizadas por um desequilíbrio quantitativo nas cadeias globinicas devido à redução ou supressão da síntese de uma das cadeias. Foram avaliados retrospetivamente os resultados de 496 casos suspeitos de α-talassémia delecional e correlacionados com os dados hematológicos. A pesquisa de deleções causadoras de α-talassémia foi efetuada por Gap e Multiplex Gap-PCR. A maioria dos casos (n=190) apresentou um genótipo normal (αα /αα), seguido de heterozigotia (-α 3 ,7 /αα) (n=148) e homozigotia (-α 3 ,7 /α 3 ,7 ) (n=141) para a deleção de 3,7kb. Detetaram-se ainda 5 casos de heterozigotia para a deleção de 4,2Kb (-α 4,2 /αα), 4 de dupla heterozigotia ( α 3 ,7 /α 4,2 ), 7 de heterozigotia α 0 (-- S E A /αα ), e 1 de Hb H (-- S E A /-α 3 ,7 ). Os resultados evidenciaram que o VGM e o HGM são excelentes índices hematológicos de rastreio e seleção dos testes moleculares, sendo o seu valor tanto mais baixo quanto maior o número de genes delecionados. Os resultados obtidos são ainda concordantes com o descrito na literatura e reforçam que o valor de cut-off de 25 pg (HGM), tem sensibilidade adequada para inferir da presença de uma deleção α 0 -talassémia. A deteção da deleção α 0 assume particular importância na prevenção da ocorrência de Hb Bart’s na descendência de um casal de portadores. O diagnóstico de α-talassémia é efetuado por métodos moleculares, no entanto os índices hematológicos são importantes marcadores preditivos do número de genes alfa delecionados e da relação fenótipo / genótipo.
- Alpha-thalassemia due to novel deletions and complex rearrangements in the subtelomeric region of chromosome 16pPublication . Ferrão, José; Silva, Marisa; Gonçalves, Lúcia; Gomes, Susana; Loureiro, Pedro; Coelho, Andreia; Miranda, Armandina; Seuanes, Filomena; Batalha Reis, Ana; Pina, Francisca; Maia, Raquel; Kjollerstrom, Paula; Monteiro, Estela; F. Lacerda, João; Lavinha, João; Gonçalves, João; Faustino, PaulaIntroduction: Inherited deletions removing the α-globin genes and/or their upstream regulatory elements (MCSs) give rise to alpha-thalassemia, one of the most common genetic recessive disorders worldwide. The pathology is characterized by microcytic hypochromic anemia due to reduction of the α-globin chain synthesis, which are essential for hemoglobin tetramerization. Material and Methods: In order to clarify the suggestive α-thalassemia phenotype in eleven patients, we performed Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification with commercial and synthetic engineered probes, gap-PCR, and Sanger sequencing to search for deletions in the subtelomeric region of chromosome 16p. Results: We have identified five distinct large deletions, two of them novel, and one indel. The deletions range from approximately 3.3 to 323 kb, and i) remove the whole α-globin cluster; or ii) remove exclusively the upstream regulatory elements leaving the α-globin genes structurally intact. The indel consists in the loss of MCS-R2 (HS-40), which is the most important distal regulatory element for the α-globin gene expression, and the insertion of 39 bp, seemingly resulting from a complex rearrangement involving two DNA segments (probably from chromosome 3q) bridging the deletion breakpoints with a CC-bp orphan sequence in between. Finally, in one patient no α-globin deletion or point mutation were found. This patient revealed to be a very unusual case of acquired alpha-thalassemia associated with a myelodysplastic syndrome. Conclusions: Our study widens the spectrum of molecular lesions by which α-thalassemia may occur and emphasizes the importance of diagnosing large α-zero-deletions to provide patients with appropriate genetic counseling.
- Alpha-thalassemia due to novel deletions and complex rearrangements in the subtelomeric region of chromosome 16pPublication . Ferrão, José; Silva, Marisa; Gonçalves, Lúcia; Gomes, Susana; Loureiro, Pedro; Coelho, Andreia; Miranda, Armandina; Seuanes, Filomena; Batalha Reis, Ana; Valtonen-André, Camila; Sonesson, Annika; Pina, Francisca; Maia, Raquel; Kjollerstrom, Paula; Monteiro, Estela; F. Lacerda, João; Lavinha, João; Gonçalves, João; Faustino, PaulaIntroduction: Inherited deletions removing the α-globin genes and/or their upstream regulatory elements (MCSs) give rise to alpha-thalassemia, one of the most common genetic recessive disorders worldwide. The pathology is characterized by microcytic hypochromic anemia due to reduction of the α-globin chain synthesis, which are essential for hemoglobin tetramerization. Material and Methods: In order to clarify the suggestive α-thalassemia phenotype in eleven patients, we performed Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification with commercial and synthetic probes, gap-PCR, and Sanger sequencing to search for deletions in the subtelomeric region of chromosome 16p. Results: We have identified six distinct large deletions, three of them novel, and one indel. The deletions range from approximately 3.3 to 323 kb, and i) remove the whole α-globin cluster; or ii) remove exclusively the upstream regulatory elements leaving the α-globin genes structurally intact. The indel consists in the loss of MCS-R2 (HS-40), which is the most important distal regulatory element for the α-globin gene expression, and the insertion of 39 nt, seemingly resulting from a complex rearrangement involving two DNA segments (probably from chromosome 3q), bridging the deletion breakpoints with a CC-bp orphan sequence in between. Finally, in one patient no α-globin deletion or point mutation were found. This patient revealed to have acquired alpha-thalassemia associated with a myelodysplastic syndrome. Conclusions: Our study widens the spectrum of molecular lesions by which α-thalassemia may occur and emphasizes the importance of diagnosing large α0-deletions to provide patients with appropriate genetic counseling.
- Anemia de células falciformes: avaliação da hemoglobina fetal num grupo de crianças angolanas antes e após tratamento com hidroxiureiaPublication . Almeida, Priscilla; Costa, Alcina; Seuanes, Filomena; Romão, Raquel; Brito, Miguel; Silva, Isabel Moreira da; Miranda, Armandina
- Avaliação dos Resultados do PNAEQ na Quantificação da HbA2Publication . Vilhena, Filipa; Correia, Helena; Cardoso, Ana; Seuanes, Filomena; Copeto, Sandra; Costa, Sandra; Miranda, Armandina; Faria, Ana PaulaA melhoria contínua constitui um dos objetivos principais do laboratório clínico. Devem ser utilizadas metodologias de controlo de qualidade interno e participação em programas de Avaliação Externa da Qualidade, que permitam identificar, prevenir e corrigir possíveis erros. A Avaliação Externa da Qualidade (AEQ) tem como objetivo avaliar o desempenho do laboratório clínico comparativamente a outros laboratórios contribuindo para a harmonização dos resultados. Nos portadores de -Talassemia, caracterizados pela diminuição da síntese de cadeias do tipo ß da hemoglobina A, a correta quantificação da Hb A2 é essencial no seu diagnóstico laboratorial.
- Controlo da qualidade interno e avaliação externa da qualidade para a quantificação da HbA2Publication . Vilhena, Filipa; Seuanes, Filomena; Copeto, Sandra; Costa, Sandra; Correia, Helena; Cardoso, Ana; Miranda, Armandina; Faria, Ana PaulaAs hemoglobinopatias são doenças monogénicas de transmissão autossómica recessiva, causadas por mutações nos genes que codificam para as cadeias globinícas, ou nas suas regiões regulatórias. Podem conduzir à síntese reduzida da hemoglobina (Hb) (talassémias) ou à formação de Hb estruturalmente anómalas (variantes). Em Portugal, a percentagem de portadores de hemoglobinopatias na população em geral varia entre 0,5 e 2,0%1. A quantificação da Hb A2 é essencial na deteção de portadores de β-talassémia, sendo muito importante na prevenção do aparecimento de formas graves de hemoglobinopatias. A deteção de portadores de β-talassémia é facilmente realizada nos fenótipos clássicos caracterizados por aumento da Hb A2 (4-6%) e diminuição dos índices eritrocitários (VGM e HGM). No entanto, devido à proximidade entre os valores de Hb A2 normais e patológicos, e aos fenótipos atípicos, com índices eritrocitários próximos do normal e valores de Hb A2 borderline (3,3-3,8%) é muito importante determinações com alto grau de reprodutibilidade e exatidão 2,3. O Controlo de Qualidade Laboratorial através do Controlo de Qualidade Interno (CQI) e da participação em programas de Avaliação Externa da Qualidade (AEQ), permite avaliar e melhorar os níveis de precisão e exatidão analítica, possibilitando a longo termo, uma avaliação retrospetiva do desempenho do laboratório, demonstrando a sua competência relativamente aos seus pares. Objetivo: Análise dos resultados do CQI e da AEQ (PNAEQ-Portugal e NEQAS-Reino Unido), da quantificação da Hb A2 pela metodologia de HPLC, do laboratório de hemoglobinopatias do INSA, no período de 2011 a 2014.
- Controlo da qualidade interno e avaliação externa da qualidade para a quantificação da HbA2Publication . Vilhena, Filipa; Seuanes, Filomena; Copeto, Sandra; Costa, Sandra; Correia, Helena; Cardoso, Ana; Miranda, Armandina; Faria, Ana PaulaAs hemoglobinopatias são doenças monogénicas de transmissão autossómica recessiva, causadas por mutações nos genes que codificam para as cadeias globínicas, ou nas suas regiões regulatórias. Podem conduzir à síntese reduzida da hemoglobina (Hb) (talassemias) ou à formação de hemoglobinas estruturalmente anómalas (variantes). Em Portugal, a percentagem de portadores de hemoglobinopatias na população em geral varia entre 0,5 e 2,0%1. A quantificação da Hb A2 é essencial na deteção de portadores de β-talassemia, sendo muito importante na prevenção do aparecimento de formas graves de hemoglobinopatias. A deteção de portadores de β-talassemia é facilmente realizada nos fenótipos clássicos caracterizados por aumento da Hb A2 (4-6%) e diminuição dos índices eritrocitários (VGM e HGM). No entanto, devido à proximidade entre os valores de Hb A2 normais e patológicos, e aos fenótipos atípicos, com índices eritrocitários próximos do normal e valores de Hb A2 borderline (3,3-3,8%), é muito importante determinações com alto grau de reprodutibilidade e exatidão 2,3. O Controlo da Qualidade Laboratorial através do Controlo da Qualidade Interno (CQI) e da participação em programas de Avaliação Externa da Qualidade (AEQ), permite avaliar e melhorar os níveis de precisão e exatidão analítica, possibilitando a longo termo, uma avaliação retrospetiva do desempenho do laboratório, demonstrando a sua competência relativamente aos seus pares.
- Deletional alpha-thalassemia and hematological phenotype: predictive parameters of different deletionsPublication . Gaspar, Gisela; Ramalho, Rita de Mira; Seuanes, Filomena; Feliciano, Carla; Duarte, Guida; Copeto, Sandra; Costa, Alcina; Santos, João Xavier; Miranda, ArmandinaIntroduction: Thalassemias are characterized by a quantitative imbalance of the globin chains due to the reduction or suppression of the synthesis of one of the globin chains.The hematological tests usually used as indicative for the investigation of α-thalassemia are the blood count with MCV (Mean Cell Volume) < 80 fL and/or MCH (Mean Cell Hemoglobin) < 27 pg and normal Hb A2 (< 3.5%). Aim: This study aimed to correlate the different deletional α-thalassemia genetic alterations with the corresponding hematological phenotype, based on casuistry from 2015 to 2019. Methodology: Was evaluated retrospectively 496 cases suspected of deletional α-thalassemia from 2015 to 2019 and correlated them with the hematological data available. We searched for α-thalassemia deletions by Gap-PCR and Multiplex Gap-PCR. Haematological evaluation was carried out by the erythrogram, Hb isoelectric focusing and quantification of Hb A2 and Hb F (Ion exchange high performance liquid chromatography). The statistical analysis of the results was carried out through calculating the mean, standard deviation, median, and t-Student test, with a significance level of 0.05. Results and discussion: Most patients (n=190) had a normal genotype (αα/αα), followed by heterozygosity (-α3.7/αα) (n=148) and homozygosity (-α3.7/α3.7) (n=141) for the 3.7kb deletion. We also detected 5 cases of heterozygosity for the 4.2Kb deletion (-α4.2/αα), 4 of double heterozygosity (α3.7/α4.2), 7 heterozygosity α0 (--SEA /αα) and 1 of HbH (--SEA/-α3.7). The results showed that the MCV and the MCH are excellent hematological indices for screening and selection of patients for molecular testing (their value being the lower the greater the number of deleted genes). Our results are in line with those described in the literature and reinforce that the cut-off value of 25 pg (MCH) is sensitive enough to infer the presence of α0 -thalassemia deletion. The detection of the α0 deletion is very important in preventing the occurrence of Hb Bart's in the offspring of a carrier couple. The diagnosis of deletional α-thalassemia is realised by genetic testing, however hematological indices are relevant predictive markers of the number of deleted alpha genes and the phenotype /genotype correlation.
- Delta Beta (δβ) thalassemia: Learning from External Quality AssessmentPublication . Miranda, Armandina; Correia, Helena; Reis, Ana; Miranda, Ana; Silva, Susana Pereira; Seuanes, Filomena; Meireles, Flora; Azevedo, Ana Paula; Faria, Ana PaulaIntroduction: External Quality Assessment Programs (EQA) evaluate retrospectively the laboratory results, assessing their performance and competence. They play a key role in the continuous training process of the professionals, contributing not only for precise and accurate results, but also to a correct interpretation. δβ thalassemia results from a deletion in genes delta and beta of chromosome 11. Although its definitive identification demands genetic analysis, the hematologic evaluation allows the presumptive identification. The hematologic phenotype of heterozygotes for δβ-thalassemia is identic to β-thalassemia carrier, with microcytosis and hypochromia where the percentage of HbA2 is not increased and Hb F is usually high, varying from 5 to 20%. In 2018, the National External Quality Assessment Program (PNAEQ), sent a sample that simulated a carrier of delta beta (δβ) thalassemia, in order to evaluate the performance of the participants registered in the Hemoglobinopathies Program. Objective: Evaluate the performance of PNAEQ’s participants in the quantification of HbA2 and HbF, and interpretation of results of a sample that simulated an δβ-thalassemia carrier.
- Diagnóstico genético da diabetes tipo MODY na população portuguesaPublication . Gaspar, Gisela; Seuanes, Filomena; Duarte, João S.; Rodrigues, Dircea; Moreno, Carolina; Gouveia, Sofia; Lobarinhas, Goreti; Bogalho, Paula; Agapito, Ana; Bourbon, Mafalda