Variantes da hemoglobina com mobilidade eletroforética semelhante à da hemoglobina S

As hemoglobinopatias são doenças genéticas relacionadas com défice da hemoglobina, a proteína vital para o transporte de oxigénio no organismo. De entre elas salienta-se a Drepanocitose causada pela variante S da hemoglobina (HbS) em homozigotia. Neste estudo pretendeu-se identificar as variantes de hemoglobina cujo padrão de migração eletroforética é semelhante ao da HbS. Foram investigados 660 casos de variantes com as características acima referidas detetadas por focagem isoelétrica. Para a identificação presuntiva foi efetuado o teste de solubilidade e a caracterização por HPLC de troca iónica e de fase reversa. A identificação das variantes raras foi efetuada através de sequenciação de Sanger do respetivo gene globínico. De entre os casos estudados, 467 foram confirmados como sendo HbS (70,8%), 101 HbD (15,3%) e 74 HbLepore (11,2%). Os restantes 18 casos (2,7%) foram classificados como variantes raras tendo sido 11 identificadas por sequenciação de DNA. Concluímos que a combinação metodológica utilizada é adequada pois permitiu o correto diagnóstico das variantes mais frequentes e com relevância clínica (HbS, HbD e HbLepore) e, nos casos raros, direcionou o estudo molecular para a análise do gene globínico alterado. A correta identificação de cada variante é essencial para um adequado acompanhamento clínico e aconselhamento genético do doente e seus familiares.

Hemoglobinopathies are genetic diseases related to hemoglobin deficiency, the vital protein for the transpor t of ox ygen in the body. Among them, the most significant is Sickle Cell Anemia caused by homoz ygosity for the hemoglobin variant S (HbS). The aim of this work was to identif y hemoglobin variants with electrophoretic mobility similar to HbS. In this study we analysed 660 cases of variants with HbS-like mobility in isoelectric focusing. For the presumptive identification the solubility test was per formed followed by ion-exchange HPLC and reversed phase-HPLC. The rare variants identification was per formed by Sanger sequencing of the corresponding globin gene. Among the evaluated cases, 467 were confirmed as HbS (70.8%), 101 HbD (15.3%) and 74 HbLepore (11.2%). The remaining 18 cases (2.7%) were classified as rare variants and 11 of them were identified by DNA sequencing. We can conclude that the methodological combination used allows the correct diagnosis of the more frequent and clinical relevant variants (HbS, HbD and HbLepore) and, in the other cases, helps to direct the molecular study for the analysis of the affected globin gene. The correct laboratorial diagnosis of each variant is essential for the adequate clinical follow-up and genetic counselling of the patients and their relatives.