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Identificação molecular de Aspergillus fumigatus em amostras de ar interior

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Orientador(es)

Resumo(s)

Os bioaerossóis sĆ£o essencialmente compostos por partĆ­culas fĆŗngicas, bactĆ©ricas e esporos de plantas, sendo os fungos responsĆ”veis pela produção de compostos orgĆ¢nicos volĆ”teis e micotoxinas. A sua presenƧa no ar interior estĆ” associada a manifestaƧƵes alĆ©rgicas, tóxicas e infecciosas. Tais respostas dependem nĆ£o só da susceptibilidade do indivĆ­duo como das espĆ©cies e concentraƧƵes de fungos presentes. Os trabalhadores de aviĆ”rios e suiniculturas sĆ£o profissionais com elevada exposição a estes agentes, pelo que tĆŖm maior risco de desenvolvimento de patologias associadas. Com este estudo pretende‑se desenvolver um mĆ©todo rĆ”pido e de elevada especificidade e sensibilidade que permita identificar as espĆ©cies de fungos clinicamente relevantes em contexto de saĆŗde ocupacional. Foi utilizado o Coriolis Air sampler para proceder Ć  recolha de amostras de ar interior (300 Lmin‑1) em seis instalaƧƵes de criação de aves e suĆ­nos. O DNA fĆŗngico foi isolado das amostras utilizando o kit Zymo ZR Fungal/Bacterial DNA e a sua presenƧa foi confirmada utilizando primers universais para fungos. A presenƧa de Aspergillus fumigatus foi pesquisada por PCR em Tempo Real utilizando sondas Taqman e primers especĆ­ficos. Os resultados obtidos foram comparados com os determinados por mĆ©todos convencionais de cultura. Foram obtidas 25 amostras de 300L de ar em seis instalaƧƵes. Os resultados obtidos confirmam a presenƧa de A. fumigatus em todas as amostras de ar em que esta espĆ©cie foi identificada atravĆ©s de culturas (3/25). Adicionalmente, foi tambĆ©m detectada em amostras de ar correspondendo a instalaƧƵes em que, atravĆ©s de culturas, esta espĆ©cie nĆ£o foi identificada no ar interior (6/25). Os resultados preliminares sugerem maior sensibilidade dos mĆ©todos moleculares relativamente aos mĆ©todos convencionais de cultura. Futuramente, pretende‑se aplicar a mesma metodologia para identificação de um maior nĆŗmero de espĆ©cies e proceder Ć  sua quantificação.

Descrição

Palavras-chave

Aspergillus Fumigatus Deteção Molecular Ar Interior Exposição Ocupacional Infecções Sistémicas e Zoonoses

Contexto Educativo

Citação

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FascĆ­culo

Editora

Escola Superior de Tecnologias de SaĆŗde de Lisboa

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