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- Investigation of the genotoxicity of digested titanium dioxide nanomaterials in human intestinal cellsPublication . Vieira, Adriana; Vital, Nádia; Rolo, Dora; Roque, Rossana; Gonçalves, Lídia M.; Bettencourt, Ana; Silva, Maria João; Louro, HenriquetaThe widespread use of titanium dioxide nanomaterials (TiO2 NMs) in food and consumer products such as toothpaste or food contact materials, suggests the relevance of human oral exposure to these nanomaterials (NMs) and raises the possibility of adverse effects in the gastrointestinal tract (GIT). We previously showed that the in vitro digestion of TiO2 NMs may increase their toxicity in intestinal cells. In this work, we analyzed the genotoxicity and the intracellular reactive oxygen species induction by physiologically relevant concentrations of three different TiO2 NMs (NM-102, NM-103 and NM-105) in Caco-2 and HT29-MTX-E12 intestinal cells, while considering the potential influence of the digestion process in the NMs' physiochemical characteristics. The results evidenced a DNA-damaging effect dependent on the NM, more relevant for the rutile/anatase NM-105, possibly due to its lower hydrodynamic size in the cells medium. In addition, the results of the micronucleus assay suggest effects on chromosomal integrity, an indicator of cancer risk, in the HT29-MTX-E12 cells, for all the tested TiO2 NMs, especially after the in vitro digestion. This work supports the evidence for concerns on the use of TiO2 NMs as a food additive, recently reported by EFSA, and for their use in applications in consumer products that may drive human exposure through ingestion.
- Pre analytical Checklist: a relevant tool for External Quality Assessment (EQA)Publication . Ventura, Catarina; Jesus, Lúcia de; Cardoso, Ana; Silva, Susana; Faria, Ana PaulaAccording to ISO 15189 2012 laboratory shall participate in an external quality assessment (programme and implement the corrective actions when necessary The EQA programs should have the effect of checking the entire analytical process, including pre and post examination procedures The National Program for External Quality Assessment (provides since 2007 EQA pre analytical schemes, including a checklist since 2016. The aim of this work is to share PNAEQ’s checklist for pre analytical phase, and evaluate trend over time of the results of PNAEQ participants, between 2019-2021.
- Effect of Aflatoxin B1 in both Caco-2 and Caco-2/HT29-MTX modelsPublication . Serrenho, I.; Vidal, N.; Rolo, D.; Louro, H.; Pereira, J.; Matos, P.; Jordan, P.; Alvito, P.About effect of Aflatoxin B1 in both Caco-2 and Caco-2/HT29-MTX models within the scope of the intestinal absorption assessment and enabling formulations.
- Avaliação da Citotoxicidade e Genotoxicidade de Nanomateriais de Celulose em Células do Trato RespiratórioPublication . Cadete, João; Silva, Maria João; Louro, HenriquetaOs nanomateriais (NM) possuem diversas propriedades físico-químicas únicas para utilização em diferentes áreas e aplicações. O desenvolvimento da nanotecnologia tem levado à produção de um número crescente de NM, por exemplo, nanomateriais de celulose (CNM). Com o aumento da sua utilização em diversas indústrias e produtos, a exposição humana a estes CNM irá acentuar-se, ocorrendo a necessidade da avaliação da sua segurança. A literatura já existente tem reportado resultados de toxicidade incoerentes, tanto positivos como negativos, justificando a necessidade de mais investigação nesta área. O trabalho desenvolvido teve o objetivo de avaliar a citotoxicidade e genotoxicidade de CNM, mais especificamente, microfibrilas de celulose (CMF) e nanocristais de celulose (CNC), em células do trato respiratório, nomeadamente, células do epitélio alveolar humano (células A549) e fibroblastos pulmonares de hamster chinês (células V79). Avaliou-se a citotoxicidade através dos ensaios do brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2-5-difeniltetrazólio (MTT) e clonogénico e a genotoxicidade pelos ensaios do cometa e do micronúcleo com bloqueio da citocinese (CBMN). A análise dos resultados mostrou que a exposição de células A549 a 7,2 - 240 μg/mL (1,5 - 50 μg/cm2) de CNC não induziu qualquer efeito citotóxico ou genotóxico. No entanto, após exposição às mesmas concentrações de CMF já se observaram efeitos citotóxicos em células V79, uma vez que se verificou uma diminuição estatisticamente significativa da capacidade de formação de colónias, após 4 dias de tratamento com as duas concentrações mais elevadas (120 e 240 μg/mL). Contudo, a CMF não provocou qualquer citotoxicidade em células A549. No que diz respeito à genotoxicidade, os CNM não induziram quebras significativas no DNA, observando-se, no entanto, danos oxidativos. A segurança de utilização dos CNM ainda não é completamente conhecida, pelo que mais estudos serão necessários para se avaliar a segurança deste tipo de NM. O trabalho aqui desenvolvido contribui para o conhecimento do potencial citotóxico e genotóxico dos CNM.
- Comportamentos face à gripe: época 2018/2019Publication . Torres, Ana Rita; Machado, Ausenda; Kislaya, Irina; Rodrigues, Ana PaulaRelatório elaborado pelo Departamento de Epidemiologia do INSA, no âmbito da monitorização da atitude e perceções relacionadas com a gripe sazonal em Portugal. A publicação tem como objetivo quantificar a carga de doença associada a gripe, bem como caraterizar a síndrome gripal, no que se refere a sintomas experienciados e aos comportamentos adotados na procura de cuidados médicos e toma de medicação, na época 2018/2019. O estudo epidemiológico, transversal, utilizou dados recolhidos mediante inquérito por questionário estruturado aplicado por entrevista telefónica ao painel de famílias do instrumento de observação ECOS (Em Casa Observamos Saúde). O trabalho de recolha de dados realizou-se entre setembro e novembro de 2019. A análise dos dados foi ponderada e extrapolada para a população residente em Portugal. De entre os resultados apresentados, destaca-se o seguinte: - Cerca de 44% dos portugueses “teve gripe ou ficou constipado” e aproximadamente, 15% teve sintomatologia compatível com a definição de síndrome gripal; - Ter tido gripe ou constipação teve impacto no quotidiano dos portugueses, tendo aproximadamente 50% referido a necessidade de ficar em casa de cama e 5% referido necessidade de cuidados assistenciais de terceiros; - Este impacto refletiu-se também em perda de capacidade ou produtividade laboral e um absentismo laboral com a duração média de 2,5 dias; - Perante o evento de gripe ou constipação, houve necessidade de procurar cuidados médicos (66%), em especial no contexto dos cuidados de saúde primários e de tomar medicação, em particular, anti-inflamatórios e antibióticos (18% e 19%, respetivamente).
- Estratégia Nacional para a Medicina Genómica - PT_MedGen: desafios e prioridadesPublication . Almeida, Fernando de; Vicente, Astrid Moura; Calado, Patrícia; Santos, Manuel; Carvalho, Ana Sofia; Águas, Cíntia; Pinto, Cátia Sousa; Silva, Mário Jorge Gaspar da; Melo, Ana Portugal; Oliveira, Mónica Duarte Correia de; Feijó, Joana; Vilarinho, Laura; Oliveira, CarlaO presente documento visa propor o conceito e as linhas de ação prioritárias da Estratégia Nacional para a Medicina Genómica (PT_MedGen). O documento baseia-se na auscultação de alguns dos principais stakeholders nacionais, representados na Comissão nomeada pelo Despacho n.o 5135/2021 coordenada pelo INSA, e ainda na consulta de outras entidades e peritos de relevância. A estratégia PT_MedGen tem a meta global de criar infraestruturas e processos que permitam a adoção de abordagens de medicina personalizada na prática clínica, a par com a contribuição para a iniciativa 1+MG. Esta estratégia promoverá ainda a investigação, a inovação, a competitividade e a internacionalização, permitindo a criação de conhecimento e valor significativos na área da saúde.
- In Vitro Hepatotoxic and Neurotoxic Effects of Titanium and Cerium Dioxide Nanoparticles, Arsenic and Mercury Co-ExposurePublication . Rosário, Fernanda; Costa, Carla; Lopes, Cláudia B.; Estrada, Ana C.; Tavares, Daniela S.; Pereira, Eduarda; Teixeira, João Paulo; Reis, Ana TeresaConsidering the increasing emergence of new contaminants, such as nanomaterials, mixing with legacy contaminants, including metal(loid)s, it becomes imperative to understand the toxic profile resulting from these interactions. This work aimed at assessing and comparing the individual and combined hepatotoxic and neurotoxic potential of titanium dioxide nanoparticles (TiO2NPs 0.75-75 mg/L), cerium oxide nanoparticles (CeO2NPs 0.075-10 μg/L), arsenic (As 0.01-2.5 mg/L), and mercury (Hg 0.5-100 mg/L) on human hepatoma (HepG2) and neuroblastoma (SH-SY5Y) cells. Viability was assessed through WST-1 (24 h) and clonogenic (7 days) assays and it was affected in a dose-, time- and cell-dependent manner. Higher concentrations caused greater toxicity, while prolonged exposure caused inhibition of cell proliferation, even at low concentrations, for both cell lines. Cell cycle progression, explored by flow cytometry 24 h post-exposure, revealed that TiO2NPs, As and Hg but not CeO2NPs, changed the profiles of SH-SY5Y and HepG2 cells in a dose-dependent manner, and that the cell cycle was, overall, more affected by exposure to mixtures. Exposure to binary mixtures revealed either potentiation or antagonistic effects depending on the composition, cell type and time of exposure. These findings prove that joint toxicity of contaminants cannot be disregarded and must be further explored.
- Estudo da interação entre moduladores da homeostasia do ferro e o gene ECA na insuficiência cardíacaPublication . Gaspar, Marcos A.; Aguiar, Laura; Ferreira, Joana; Faustino, Paula; Mascarenhas, Mário Rui; Menezes Falcão, Luís; Bicho, Manuel; Inácio, ÂngelaIntrodução: A insuficiência cardíaca (IC) diz respeito a um síndrome clínico composto por um conjunto de sintomas e/ou sinais com origem numa anomalia cardíaca estrutural e/ou funcional e que dá origem à inabilidade de bombear sangue em quantidade suficiente, de forma a preencher as necessidades metabólicas do organismo. No presente trabalho, pretendemos perceber como a interação entre a variação I/D no gene ECA e possíveis moduladores da homeostasia do ferro (Fe) influenciam a IC. Os moduladores em estudo foram: a atividade da redutase da metahemoglobina, o gene Hfe e o gene da heparanase (HPSE) Metodologia: Foi efetuado um estudo de caso-controlo, no qual foram utilizadas 252 amostras de portugueses, 143 indivíduos com IC e 109 controlos saudáveis. Para analisar o polimorfismo no gene HPSE (rs4693608) foi feita a genotipagem por endpoint (LightCycler480). Para analisar os polimorfismos no gene Hfe (H63D e C282Y) recorreu-se à técnica de ARMS Multiplex. Para a análise do polimorfismo no gene ECA (rs4646994 - I/D) realizou-se um PCR. A atividade da redutase da metahemoglobina foi obtida por testes espetrofotométricos. Todos os testes estatísticos necessários foram realizados no software IBM® SPSS® Statistics 26.0, tendo os valores sido considerados significativos para um p < 0,05. Resultados: Verificou-se uma associação entre a IC e: 1) a presença do alelo D do gene HFe (HH vs HD; p=0,049); 2) a presença do alelo A do gene HPSE (AA + GA vs GG; p=0,045; 3) níveis mais baixos da atividade da redutase da metahemoglobina (p=0.019). Verificou-se ainda que as epistasias entre a presença do alelo H ou C do gene Hfe e o alelo D do gene ECA são protetores na IC (p=0,041 para ambas). Conclusão: Os resultados deste estudo evidenciam o papel da homeostasia do ferro e da sua interação com a ECA na IC. O ferro é um componente essencial para o bom funcionamento das mitocôndrias, as quais têm um papel importante no fornecimento de energia ao musculo cardíaco. O conhecimento do perfil genótipo dos doentes em genes moduladores da homeostasia do ferro em interação com o gene ECA, poderá ser uma vantagem na aplicação de uma medicina mais personalizada, permitindo um aconselhamento preventivo e uma terapêutica mais dirigidos.
- Mycotoxin Exposure during the First 1000 Days of Life and Its Impact on Children’s Health: A Clinical OverviewPublication . Alvito, Paula; Pereira-da-Silva, LuísThe first 1000 days of life are very sensitive to any event that alters health programming, and they represent a window for intervention to improve population health. Pregnant women, fetuses, and infants are particularly vulnerable to exposure to food contaminated with mycotoxins. This review aimed to gather data from the literature on mycotoxins exposure during intrauterine life and early childhood, and associated health risks, as assessed through human biomonitoring and mycotoxins occurrence in foods, in different continents. Maternal internal exposure to aflatoxins is associated with fetal growth restriction, while exposure to fumonisins increases the risk of offspring’s neural tube defects. Mycotoxin contamination of breast milk is reported worldwide, but data on adverse effects of the lactational transfer of mycotoxins on infant health are lacking. Young children are exposed to mycotoxins through contaminated infant formulas and baby foods. Both external and internal exposure to aflatoxins and fumonisins in children are reported to be associated with growth impairment. In low-income settings, where other co-factors can affect growth, this association should be interpreted with caution. Further studies on human biomonitoring of mother–infant pairs and young children are needed to guide management strategies aiming to minimize mycotoxin exposure at critical developmental stages.
- Multidrug-Resistant Methicillin-Resistant Coagulase-Negative Staphylococci in Healthy Poultry Slaughtered for Human ConsumptionPublication . Silva, Vanessa; Caniça, Manuela; Ferreira, Eugénia; Vieira-Pinto, Madalena; Saraiva, Cândido; Pereira, José Eduardo; Capelo, José Luis; Igrejas, Gilberto; Poeta, PatríciaCoagulase-negative staphylococci are commensals that are known to be prevalent in most environments, and they are also an important reservoir of antimicrobial-resistant genes. Staphylococcal infections in animal husbandry are a high economic burden. Thus, we aimed to determine the prevalence and species diversity of methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci (MRCoNS) in poultry slaughtered for human consumption and to study the antimicrobial resistance of the isolates. Swab samples were recovered from 220 commercial chickens, homebred chickens and quails. Species identification was performed using MALDI-TOF. Antimicrobial susceptibility testing was performed by the disc diffusion method against 14 antimicrobials. The presence of antimicrobial-resistant genes was investigated by polymerase chain reaction. Totals of 11 (19.6%), 13 (20.3%), and 51 (51%) MRCoNS were isolated from commercial chickens, homebred chickens and quails, respectively. S. lentus was isolated from all homebred chickens, whereas 11 S. lentus and 2 S. urealyticus were isolated from commercial chickens. As for quails, the most prevalent MRCoNS were S. urealyticus. Almost all isolates had a multidrug-resistant profile and carried the mecA gene. Most isolates showed resistance to erythromycin, clindamycin, penicillin, tetracycline, ciprofloxacin and fusidic acid and harbored the ermA, ermB, ermC, mphC tetK, tetL, tetM and tetO genes. This study showed a frequent occurrence of multidrug resistance in MRCoNS isolated from healthy poultry in Portugal.
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