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Avaliação da Citotoxicidade e Genotoxicidade de Nanomateriais de Celulose em Células do Trato Respiratório

dc.contributor.advisorSilva, Maria João
dc.contributor.advisorLouro, Henriqueta
dc.contributor.authorCadete, João
dc.date.accessioned2022-11-28T12:11:37Z
dc.date.available2022-11-28T12:11:37Z
dc.date.issued2022-03
dc.descriptionDissertação de mestrado em Bioquímica, apresentada à Universidade NOVA de Lisboa, 2022.pt_PT
dc.descriptionOrientadora Maria João Silva, Coorientadora Henriqueta Louro, INSA.pt_PT
dc.description.abstractOs nanomateriais (NM) possuem diversas propriedades físico-químicas únicas para utilização em diferentes áreas e aplicações. O desenvolvimento da nanotecnologia tem levado à produção de um número crescente de NM, por exemplo, nanomateriais de celulose (CNM). Com o aumento da sua utilização em diversas indústrias e produtos, a exposição humana a estes CNM irá acentuar-se, ocorrendo a necessidade da avaliação da sua segurança. A literatura já existente tem reportado resultados de toxicidade incoerentes, tanto positivos como negativos, justificando a necessidade de mais investigação nesta área. O trabalho desenvolvido teve o objetivo de avaliar a citotoxicidade e genotoxicidade de CNM, mais especificamente, microfibrilas de celulose (CMF) e nanocristais de celulose (CNC), em células do trato respiratório, nomeadamente, células do epitélio alveolar humano (células A549) e fibroblastos pulmonares de hamster chinês (células V79). Avaliou-se a citotoxicidade através dos ensaios do brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2-5-difeniltetrazólio (MTT) e clonogénico e a genotoxicidade pelos ensaios do cometa e do micronúcleo com bloqueio da citocinese (CBMN). A análise dos resultados mostrou que a exposição de células A549 a 7,2 - 240 μg/mL (1,5 - 50 μg/cm2) de CNC não induziu qualquer efeito citotóxico ou genotóxico. No entanto, após exposição às mesmas concentrações de CMF já se observaram efeitos citotóxicos em células V79, uma vez que se verificou uma diminuição estatisticamente significativa da capacidade de formação de colónias, após 4 dias de tratamento com as duas concentrações mais elevadas (120 e 240 μg/mL). Contudo, a CMF não provocou qualquer citotoxicidade em células A549. No que diz respeito à genotoxicidade, os CNM não induziram quebras significativas no DNA, observando-se, no entanto, danos oxidativos. A segurança de utilização dos CNM ainda não é completamente conhecida, pelo que mais estudos serão necessários para se avaliar a segurança deste tipo de NM. O trabalho aqui desenvolvido contribui para o conhecimento do potencial citotóxico e genotóxico dos CNM.pt_PT
dc.description.abstractNanomaterials (NM) have several unique physicochemical properties for use in different areas and applications. The nanotechnology development has led to the production of an increasing number of NM, for example, cellulose nanomaterials (CNM). With the increase in their use in various industries and products, human exposure to these CNM will increase, resulting in the need to assess their safety. The existing literature has reported incoherent toxicity results, both positive and negative, justifying the need of more investigation in the area. This work had the goal of evaluating cytotoxicity and genotoxicity of CNM, specifically, cellulose microfibrils (CMF) and cellulose nanocrystals (CNC), in respiratory tract cells, namely, human alveolar epithelial cells (A549) and chinese hamster lung fibroblasts (V79). Cytotoxicity was evaluated by 3-(4,5- Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide (MTT) and clonogenic assays and genotoxicity by comet and cytokinesis-blocked micronucleus (CBMN) assays. The analysis of results showed that exposure of A549 cells to 7,2 - 240 µg/mL (1,5 - 50 µg/cm2 ) of CNC did not induce any cytotoxic or genotoxic effect. Nonetheless, after exposure to the same concentrations of CMF cytotoxic effects were observed in V79 cells, since it was found a statistically significant decrease in colony forming ability, after a 4-day treatment with the two highest concentrations (120 e 240 µg/mL) tested. However, CMF did not induce any cytotoxicity in A549 cells. Regarding its genotoxicity evaluation, this CNM did not induce significant DNA breaks, however, oxidative damage was observed. The safety of using CNM is still not completely known, thus more studies are needed to assess the safety of this type of NM. This work contributes to the knowledge of the cytotoxic and genotoxic potential of CNMpt_PT
dc.description.sponsorshipToxApp4NanoCELFI (PTDC/SAU-PUB/32587/2017), financiado pela FCT/MCTESpt_PT
dc.description.versionN/Apt_PT
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10400.18/8337
dc.language.isoporpt_PT
dc.peerreviewedyespt_PT
dc.relationA predictive toxicology approach to characterize potential respiratory effects of functionalized nanocellulose fibres in a co-culture system
dc.subjectNanomateriaispt_PT
dc.subjectCelulose Microfibrilarpt_PT
dc.subjectCelulose Nanocristalinapt_PT
dc.subjectEnsaio do Cometapt_PT
dc.subjectEnsaio do Micronúcleopt_PT
dc.subjectGenotoxicidade Ambientalpt_PT
dc.subjectNanomaterialspt_PT
dc.subjectEnvironmental Genotoxicitypt_PT
dc.subjectMicrofibrilar Cellulosept_PT
dc.subjectNanocrystalline Cellulosept_PT
dc.subjectComet Assaypt_PT
dc.subjectMicronucleus Assaypt_PT
dc.titleAvaliação da Citotoxicidade e Genotoxicidade de Nanomateriais de Celulose em Células do Trato Respiratóriopt_PT
dc.typemaster thesis
dspace.entity.typePublication
oaire.awardTitleA predictive toxicology approach to characterize potential respiratory effects of functionalized nanocellulose fibres in a co-culture system
oaire.awardURIinfo:eu-repo/grantAgreement/FCT/3599-PPCDT/PTDC%2FSAU-PUB%2F32587%2F2017/PT
oaire.citation.conferencePlaceLisboa, Portugalpt_PT
oaire.citation.endPage56pt_PT
oaire.citation.startPagexxvi, 1pt_PT
oaire.fundingStream3599-PPCDT
project.funder.identifierhttp://doi.org/10.13039/501100001871
project.funder.nameFundação para a Ciência e a Tecnologia
rcaap.rightsclosedAccesspt_PT
rcaap.typemasterThesispt_PT
relation.isProjectOfPublication0c494598-bc88-4e48-8032-cb9f4b4c0b0f
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