Carga treponémica em amostras biológicas correspondentes a diferentes fases clínicas de sífilis

Pinto, Miguel; Antelo, Minia; Ferreira, Rita; Azevedo, Jacinta; Santo, Irene; Borrego, Maria José; Gomes, João Paulo

http://hdl.handle.net/10400.18/3698

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[PT] Sífilis, a doença sexualmente transmitida causada por Treponema pallidum, apresenta diferentes manifestações clinicas. No entanto, os fatores que levam às diversas progressões da doença permanecem desconhecidos. Este estudo teve como objetivo a quantificação da carga treponémica, em diversas amostras biológicas, para contribuir para uma melhor compreensão da doença. Analisaram-se 309 amostras de DNA de distintos locais anatómicos associados a diferentes manifestações de sífilis. Uma quantificação absoluta por PCR em tempo-real foi utilizada para quantificar precisamente o número de células treponémicas e humanas, e calcular a carga treponémica em cada amostra. Os exsudados de lesões primárias apresentaram as cargas treponémicas mais elevadas contrastando com as amostras sanguíneas. Uma grande dispersão de concentrações bacterianas foi observada nas amostras sanguíneas dos casos de sífilis secundária. T. pallidum foi detetado em 37 amostras de indivíduos seronegativos e em 13 casos de sífilis tratada. Este estudo sugere um cenário onde a sífilis poderá ser caracterizada por: i) cargas elevadas e heterogéneas na sífilis primária, refletindo a duração do desenvolvimento e resolução da lesão; ii) uma potencial capacidade replicativa de T. pallidum na corrente sanguínea, sugerida pela elevada dispersão de concentrações na sífilis secundária; e iii) uma evasão bacteriana quer ao sistema imunitário do hospedeiro quer ao tratamento antibiótico.

[EN] Syphilis is the sexually transmitted disease caused by Treponema pallidum, which presents distinct clinical manifestations posing different implications for diagnosis. Nevertheless, the inherent factors leading to diverse disease progressions are still unknown. We aimed to assess the association between treponemal loads and dissimilar disease outcomes, to better understand syphilis. We analyzed 309 DNA samples from distinct anatomic sites associated with particular syphilis manifestations. An absolute quantitative real-time PCR procedure was used to precisely quantify the number of treponemal and human cells to calculate T. pallidum loads in each sample. Exudates from primary lesions presented the highest T. pallidum loads in contrast with bloodderived samples. High dispersion of T. pallidum concentrations was observed in blood-derived samples from secondary syphilis. T. pallidum was detected in substantial amounts in 37 samples of seronegative individuals and in 13 cases considered as syphilis-treated. This study suggests a scenario where syphilis may be characterized by: i) heterogeneous and high treponemal loads in primary syphilis, reflecting dissimilar duration of chancres development and resolution; ii) potential replication capability of T. pallidum while in the bloodstream, suggested by high dispersion of bacterial concentrations in secondary syphilis cases; and iii) bacterial evasiveness, either to the host immune system or antibiotic treatment.