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- Effects of bacillamide and newly synthesized derivatives on the growth of cyanobacteria and microalgae culturesPublication . Churro, Catarina; Alverca, Elsa; Sam-Bento, Filomena; Paulino, Sérgio; Figueira, Valdemar; Bento, Artur; PrabhaKar, Sundaresan; Lobo, Ana; Calado, António; Pereira, PauloThe antialgal activity of newly synthesized bacillamides against several cyanobacteria and microalgae isolates was screened using a rapid 96-well microplate bioassay. Cultures were exposed to serial dilutions of each bacillamide derivative (0–160 μg mL−1) in the microplate wells and daily optical measurements were used to estimate growth over a 216 h period. Inhibition values (%) were calculated from the estimated growth curves and inhibitory concentrations (IC50-216 h) were obtained from the sigmoidal inhibition curves fitted by regression analysis. The effects of bacillamides on cell morphology and ultrastructure were also analysed by light and transmission electron microscopy. In general, the toxic cyanobacteria Microcystis aeruginosa, Aphanizomenon gracile, Anabaena circinalis and Anabaenopsis circularis were much more sensitive to bacillamides then the chlorophytes Ankistrodesmus falcatus and Scenedesmus obliquus. However, clear signs of morphological and ultrastructural changes induced by bacillamide were observed on both cyanobacteria and chlorophytes. Other cyanobacteria, namely the nostocalean Nodularia spumigena and the oscillatorialeans Leptolyngbya sp. and Planktothrix rubescens, exhibit higher tolerances to bacillamides, similar to that shown by different eukaryotic microalgae. Diatoms, on the other hand, proved to be quite as sensitive to most bacillamides as the most affected cyanobacteria. The properties of 5-iodo-Bacillamide (algicide or algistatic) were further investigated. This compound acted as an algistactic agent against eukaryotic algae and, depending on its concentration, acted as either an algicide or algistactic agent against most of the cyanobacteria tested. Although bacillamides cannot be considered as broad spectrum cyanobacterial algicides, different bacillamides might be of use in selectively controlling the growth of particular species of cyanobacteria.
- Médicos-Sentinela : relatório de actividades 2007Publication . Departamento de EpidemiologiaEm 2007, na globalidade, participaram na Rede 151 clínicos. A rede iniciou-se no ano em causa com 139 Médicos-Sentinela. Ao longo do ano concretizaram-se 12 novas adesões e 7 desistências, saldando–se o ano com 141 Médicos-Sentinela no Continente, o que correspondeu a 2,5% do total de Clínicos Gerais a desempenhar funções nos Centros de Saúde do Continente. Na Região Autónoma da Madeira colaboram dois MS e na dos Açores, um.
- Comparative study of the cytotoxic effects of microcystin-LR in mammalian cell lines: Vero, HepG2, Caco2 and MDCKPublication . Menezes, Carina; Amorim, Ana; Alverca, ElsaMicrocystin-LR (MCLR) is a natural occurring freshwater cyanotoxin, recognized as one of the most toxic microcystin variants. It is thought to be responsible for cases of livestock and human intoxication due to consumption of toxic cyanobacteria-contaminated water. Although considered a hepatotoxin, MCLR also targets other organs such as the kidneys and intestines. In spite the cellular mechanisms associated with the toxicity of MCLR are still unclear, a previous work in a monkey kidney cell line suggested that the endoplasmic reticulum was an early target of MCLR toxicity and that autophagy was triggered as a cell defense mechanism at subcytotoxic concentrations of MCLR. In the present work, cytotoxic, morphological and ultrastructural effects of MCLR were compared in HepG2 (human liver), Vero (monkey kidney), MDCK (dog kidney) and Caco2 (human intestine) cell lines. MCLR induced a concentration-dependent decrease in cell viability by the NR assay in all cell lines, with HepG2 and Vero showing the lowest cytotoxic thresholds of 25 and 50 μM MCLR, respectively. In these cells, MCLR exposure induced lysosomal damages previously to mitochondrial disruption, reinforcing the role of lysosomes in MCLR-induced toxicity. Immunolabelling and ultrastructural visualization of autophagosomes, showed that autophagy was a response transversal to both cell lines, triggered at subcytotoxic MCLR concentrations, confirming its importance as a defense mechanism to early damages inflicted by the toxin. The analysis of GRP94, an ER stress protein, did not undoubtedly demonstrate that MCLR targets the ER. However, together with the ultrastructural data, suggested that in both HepG2 and Vero cells, the ER has a role in autophagy induction. Additionally, in HepG2 cells, GRP94 down-regulation with increasing MCLR concentrations supported the ER role in the triggering of apoptosis. At high toxin concentrations, ultrastructural alterations consistent with apoptosis were observed for all four cell lines, proving that this is a general MCLR-induced mechanism.
- Detecção e caracterização molecular de defeitos no ciclo da carnitinaPublication . Sousa, Carmen; Mendo, Sónia; Vilarinho, LauraO ciclo da carnitina é uma etapa fundamental da oxidação mitocondrial dos ácidos gordos de cadeia longa, porque catalisa o seu transporte até à matriz mitocondrial para serem oxidados. Este transporte requer quatro proteínas. O transportador de carnitina orgânico (OCTN2), a carnitina palmitoiltransferase 1 (CPT1), a carnitina acilcarnitina translocase (CACT) e a carnitina palmitoiltransferase 2 (CPT2). As alterações nos genes que codificam estas proteínas causam doenças da oxidação mitocondrial dos ácidos gordos, com uma apresentação clínica metabólica, miopática ou cardíaca, que estão associadas à morte súbita infantil. A espectrometria de massa em tandem veio possibilitar o rastreio destas patologias através da avaliação do perfil de acilcarnitinas. Este estudo baseia-se na sua detecção e caracterização molecular. Foram estudados 15 casos e 30 familiares; 11 casos do rastreio neonatal, 2 provenientes de centros estrangeiros e 2 casos com fenótipo clínico. Foram caracterizados molecularmente 13 casos, detectadas 14 mutações causais, cinco das quais não estavam descritas na literatura ou na base de dados HGMD e 8 variantes polimórficas descritas no NCBI. Foram encontradas 5 mutações missense, 4 mutações frameshift (pequenas delecções e inserções), 1 mutação nonsense, 2 delecções e 2 mutações splicing. Este estudo permitiu a confirmação de diagnóstico em nove casos com deficiência no transportador de carnitina, três casos com deficiência em carnitina palmitoiltransferase 2 e um caso com deficiência em carnitina palmitoiltransferase 1. Tornou disponível a caracterização molecular de doentes futuros com diagnóstico clínico, ou bioquímico, deste tipo de patologias.
- Plano de Desenvolvimento Estratégico 2008-2012Publication . Instituto Nacional de saúde Doutor Ricardo Jorge, IPPlano de desenvolvimento estratégico do INSA,I.P. para 2008-2012. Este instrumento tem como objetivo apresentar a visão, os valores institucionais e as linhas estratégicas a adotar durante este período.
- 3-Metilcrotonilglcinuria: identificação e caracterização molecularPublication . Fonseca, Helena Susana Rodrigues Almeida; Mendo, Sónia; Vilarinho, LauraO rastreio neonatal é um programa sistemático destinado a todos os recémnascidos, tendo como objectivo evitar a evolução da patologia rastreada através do diagnóstico pré-sintomático e da instituição precoce de terapia adequada. A 3-metilcrotonilglicinúria (MCG) é uma doença incluída no rastreio que até recentemente era considerada uma doença hereditária do metabolismo rara. Na MCG o catabolismo da leucina é bloqueado no quarto passo devido a deficiência da enzima 3-metilcrotonil-CoA carboxilase (3-MCC). A 3-MCC catalisa a conversão do 3-metilcrotonil-CoA a 3-metilglutaconil-CoA, uma reacção reversível dependente de ATP e utilizando o bicarbonato como fonte de grupos carboxílo. O diagnóstico bioquímico da deficiência em 3-MCC é caracterizado pelo aumento marcado dos ácidos 3-hidroxisovalérico (3-HIVA) e 3-metilcrotonilglicina (3-MCG) na urina e concentrações elevadas de 3- hidroxisovalerilcarnitina (C5-OH) no sangue. A caracterização molecular reside no estudo dos genes MCCA e MCCB que codificam a enzima 3-MCC. O objectivo deste trabalho foi estabelecer um diagnóstico etiológico em doentes com MCG detectados pelo Programa Nacional de Diagnóstico Precoce e que possuíam um valor de C5-OH, marcador bioquímico primário de rastreio para esta patologia, superiores ao cut-off estabelecido. Numa amostra de 20 doentes pretende-se identificar e caracterizar as mutações mais frequentes na nossa população recorrendo a análise de 19 exões no gene MCCA e 17 exões no gene MCCB. Destes casos seleccionados para estudo, foram detectadas 26 mutações das quais 16 não se encontram ainda descritas na literatura nem na base de dados Human Gene Mutation Database, o que corresponde a uma percentagem de novas mutações de 61.5%. Os resultados obtidos permitiram concluir que o génotipo não consegue predizer o fenótipo ou o risco metabólico destes casos, mas permite confirmar o diagnóstico nos casos duvidosos. A deficiência em 3-MCC ainda não é uma patologia completamente conhecida e a sua apresentação clínica é bastante heterogénea, sendo a maioria dos doentes portadores de mutações próprias não sendo visível uma correlação genótipo – fenótipo. A continuação deste estudo é necessária para encontrar marcadores genéticos e/ou bioquímicos que expliquem a razão pela qual um número relativamente reduzido de indivíduos apresenta risco de desenvolver um fenótipo severo da doença. Verificou-se também que o estudo molecular é importante no diagnóstico de portadores sintomáticos ou assintomáticos (diagnóstico preditivo), no diagnóstico pré-natal, aconselhamento genético e com indicação para suplementação com biotina para os pacientes que tem a mutação que responde à biotina.
- Inquérito Nacional de Saúde 2005-2006Publication . Instituto Nacional de Saúde Doutor Ricardo Jorge, IP; Instituto Nacional de Estatística, IPObjectivo: Estimar indicadores sobre o estado de saúde da população portuguesa através da realização do quarto Inquérito Nacional de Saúde. Metodologia: Inquérito geral de saúde com recolha de dados por entrevista directa, no domicilio, a uma amostra probabilística, representativa da população residente em unidades de alojamento em Portugal. As áreas estudadas foram: •Estado de saúde, doenças crónicas e incapacidades (estado de saúde auto-percebido, peso e obesidade, incapacidade temporária, incapacidade física de longa duração, doenças crónicas, sofrimento psicológico), com vista à caracterização do estado de saúde e doença da população residente; •Cuidados de saúde e prevenção (consultas médicas, saúde oral, utilização de medicamentos, saúde reprodutiva, vacinação contra a gripe, monitorização do colesterol e tensão arterial elevada, doação de sangue, utilização dos subsistemas de saúde e seguros de saúde), com vista à caracterização dos residentes sobre comportamentos preventivos e curativos; •Determinantes da saúde relacionados com estilos de vida (consumo de tabaco, consumo de alimentos, consumo de bebidas alcoólicas, actividade física), com vista à caracterização dos hábitos dos residentes que podem constituir elementos preventivos da doença; •Qualidade de vida (qualidade de vida auto-percebida). Resultados: Publicação com os principais apuramentos do Quarto Inquérito Nacional de Saúde, realizado em parceria pelo Instituto Nacional de Saúde Dr. Ricardo Jorge (INSA) e pelo Instituto Nacional de Estatística (INE) entre Fevereiro de 2005 e Fevereiro de 2006. O trabalho contou também com a colaboração da Direcção-Geral de Saúde e das Secretarias Regionais dos Assuntos Sociais dos Açores e da Madeira. É o primeiro inquérito de saúde por entrevista que abrange as populações residentes na Região Autónoma dos Açores e na Região Autónoma da Madeira, pelo que constitui o primeiro retrato da saúde em Portugal que reflecte a expressão de todos os residentes no País. Por outro lado, a nível nacional, é também o primeiro inquérito deste tipo em que os resultados não correspondem a valores amostrais, reportando a toda a população residente, através da aplicação de um método matemático que expande as respostas individuais tendo em conta a composição etária e por sexo dos habitantes. Esta característica abrange também os resultados do inquérito realizado em 1998/1999 pelo INSA, viabilizando uma leitura da evolução temporal dos principais comportamentos face à saúde para a população residente no Continente. As edições anteriores, incluindo a relativa ao inquérito 1998/1999, apresentavam apenas contagens amostrais, pelo que esses resultados não são comparáveis com os agora apresentados.
- Molecular characterization of a new isolate of Borrelia lusitaniae derived from Apodemus sylvaticus in PortugalPublication . de Carvalho, Isabel Lopes; Zeidner, N.; Ullmann, A.; Hojgaard, A.; Amaro, F.; Zé-Zé, Líbia; Alves, M.J.; De Sousa, R.; Piesman, J.; Núncio, M.S.A total of 196 small mammals were collected in Portugal and tested for Borrelia burgdorferi sensu lato. Tissue samples were taken from each animal and cultured in Barbour-Stoenner-Kelly (BSK)-II medium. The single strain of spirochete isolated was confirmed as Borrelia lusitaniae by genetic analyses. This is the first report of B. lusitaniae isolated from Apodemus sylvaticus.
- Avaliação do impacte de políticas de diferentes sectores na saúde e nos sistemas de saúde: um ponto de situaçãoPublication . Santos, Maria João Heitor dos; Miguel, José Manuel Pereira
- Influence of the APOE genotypes in some atherosclerotic risk factorsPublication . Martins, M. Carmo; Lima Faleiro, L.; Rodrigues, M.O.; Albergaria, I.; Fonseca, A.The aim of this work was to study the distribution of apolipoprotein E (APOE) genotypes and their association with some atherosclerotic risk factors, all of them modifiable: total, HDL and LDL cholesterol, triglycerides, systolic and diastolic blood pressure, BMI, waist circumference and smoking. The sample population was constituted of 672 healthy subjects recruited in the Lisbon area. Lipids were quantified by usual automatic enzymatic methods and the APOE genotypes performed in accordance with Hixson and Vernier. Blood pressure measurement and hypertension classification followed international specifications. The frequency distribution of APOE alleles was: epsilon2 = 6.4%, epsilon3 = 83.6% and epsilon4 = 10.0% and the more prevalent genotypes were epsilon2/epsilon3, epsilon3/epsilon3 and epsilon3/epsilon4 respectively 11.0%, 70.1% and 16.1%. We could only observe associations among the most prevalent genotypes and lipids, always statistically significant, specially when the epsilon4 allele was present which was even proved by an higher prevalence of epsilon4 in dyslipidemic subjects with the only exception of those with low HDL-c values. A stronger intervention in the epsilon4 carriers is so recommended through appropriate intervention measures on the connected modifiable risk factors.