Logo do repositório

Percorrer por autor "Santos, Manuela"

A mostrar 1 - 6 de 6
  • BETA-SARCOGLICANOPATIA- uma distrofia muscular das cinturas com diferentes prognósticos
    Publication . Dias, Andreia; Taipa, Ricardo; Pires, Melo; Vieira, Emília; Santos, Rosário; Santos, Manuela
    As sarcoglicanopatias são um sub grupo das distrofias musculares das cinturas (LGMD) com transmissão autossómica recessiva, que resultam de mutações em uma das subunidades do complexo proteico dos sarcoglicanos (α,β,γ,δ). Este grupo proteico é fundamental para o normal funcionamento da célula muscular, uma vez que pela ligação à distrofina e aos distroglicanos assegura a integridade da membrana durante a contracção muscular e fornece suporte a moléculas sinalizadoras. As β sarcoglicanopatias (LGMDE) são consequência de mutação no gene 4q12 (6 exões) e a manifestação clínica clássica é fraqueza muscular progressiva das cinturas escapular e pélvica. Contudo, as manifestações fenotípicas e evolução clínica são muito amplas.
    2012-10-11Documento de conferência Desconhecido Ver mais
  • Complexo distrofina-gllcoproteínas - a propósito de um doente com distrofia de Becker
    Publication . Monteiro, Cecília; Taipa, Ricardo; Melo Pires, Manuel; Guimarães, António; Gonçalves, Ana Rita; Vieira, Emília; Santos, Rosário; Santos, Manuela
    Introdução: A distrofina faz parte do complexo distrofina-glicoproteínas (DAG - dystrophin associated glicoproteins) que inclui as sarcoglicanos α, β, y e δ, bem com as distroglicanos α e β. O estudo imunohistoquímico da biopsia muscular das distrofinopatias pode assim mostrar alterações na marcação não só da distrofina, como também das outras proteínas associadas. Caso clínico: Apresentamos um doente do sexo masculino com quadro clínico caracterizado por cãibras e dores musculares desencadeadas pelo esforço, com início aos 3 anos. É filho de pais não consanguíneos e não tem história familiar de doenças neuromusculares. Na primeira observação objectivou-se fraqueza muscular proximal. O valor de CK era 16700 U/L e a biópsia muscular mostrou uma distrofia muscular com diminuição grave das marcações para Dys-2, Dys-3, α-, y-sarcoglicanos e α-distroglicano; as marcações para Dys 1, β- e δ-sarcoglicano apresentavam-se ligeiramente deficitárias, e a disferlina era normal. Efectuou estudo genético com multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) para distrofinopatias que não mostrou delecções ou duplicações, e o estudo para sarcoglicanos não mostrou alterações patogénicas. Aos 6 anos foi referenciado para a consulta de doenças neuromusculares pediátrica do CHP: apresentava tetraparésia de predomínio proximal, com um envolvimento marcado cintura escapular, e hipertrofia dos deltóides e gemelar. Por sequenciação detalhada foi encontrada uma mutação no intrão 26 do gene da dístrofina (c.3603+3A>T). Em estudo do RNA obtido a partir do músculo, foram observados dois transcritos alternativos: um normal e um que inclui parte do intrão 26, resultando num mensageiro out-of-frame. Actualmente, com 11 anos e após início da fisioterapia houve uma melhoria clínica e funcional mantendo a fraqueza das cinturas com um envolvimento escapular marcado nomeadamente com atrofia. Não tem envolvimento cardíaco nem contracturas musculares. Comentários A mutação detectada, sendo out-of-frame, prevê um fenótipo de distrofia de Duchenne; no entanto, a produção residual de transcritos normais explica a apresentação como distrofia de Becker. Este doente tem a particularidade de ter uma distribuição da fraqueza pouco usual, sendo fenotipicamente semelhante às "distrofias das cinturas". As alterações marcadas no estudo imunohístoquimico podem fazer sugerir que existe uma maior agravamento do défice de força muscular dos 4 membros mais acentuada à direita, hiperreflexia OT, emagrecimento marcado (>20Kg), fasciculações, caimbras, dispneia e disfagia para líquidos. As provas de provas de função respiratória revelaram um compromisso dos grupos musculares inspiratórios e restrição volumétrica discreta. A reavaliação electromiográfica identificou lesão neurogénia crónica com aspectos de desinervação/reinervação, fasciculações nos 4 membros e músculos bulbares; coexistindo alguns aspectos miopáticos nos músculos mais proximais. A pesquisa de neoplasia oculta foi realizada anualmente, sendo persistentemente negativa. Uma segunda biopsia muscular realizada 9 anos após o início do quadro revelou a existência de aspectos compatíveis com Miosite Necrotizante. Discussão A probabilidade de coexistência de critérios clínicos e neurofisiológicos de DNM/ELA e Miosite Necrotizante versus uma única entidade clínica, numa mesma doente é discutida.
    2012-03-17Documento de conferência Desconhecido Ver mais
  • Distrofias musculares congénitas e LMNA
    Publication . Santos, Manuela
    As distrofias musculares congénitas (CMD) são doenças com início no primeiro ano de vida, sendo os grupos mais comuns as merosinopatias, as doenças do colagénio e as distroglicanopatias. O diagnóstico etiológico passa pela caraterização clinica e investigação com estudo bioquímico (Ck), imagem cerebral e pela histologia do músculo. Após uma avaliação global, na maioria dos casos, é possível uma orientação concreta para estudo genética molecular. Apresentamos um caso dum doente com uma forma menos comum de distrofia muscular congénita. Caso clinico: Menino de 4A, cognitivamente normal, com atraso nas aquisições motoras e que aos 2A necessitava apoio para levantar do chão. Observado aos 2 A6M, tinha uma hipotrofia muscular global, diparesia facial, palato alto e tetraparesia com predomínio axial nomeadamente dos flexores do pescoço. Tinha aumento da consistência gemelar. A Ck era de 2468U/L, a RM cerebral era normal e a histologia mostrava um musculo distrófico com fibrose marcada, com marcaçóes para merosina, distrofinas e sarcoglicanos normais, sendo o alfa distroglicano menos evidente. O estudo para o gene FKRP não mostrou alterações. Um ano depois, apresentava uma escoliose lombar, limitação da flexão do pescoço. Em simultâneo decorria a investigação molecular tendo sido encontrado deleção c.1381-6_1384,no gene LMNA. Comentários: As mutações do gene LMNA podem ocasionar vários fenótipos musculares – Emery Dreifuss, LGMD, CMD com rigid spine. Nestes últimos, as Ck estão elevadas, a RM cerebral é normal e o músculo pode ser inicialmente miopático e só mais tarde, distrófico. O diagnóstico é frequentemente mais tardio dada a ausência de retracções aquando dos primeiros sintomas. Este doente tem a particularidade de precocemente ter um músculo com características claramente distróficas. Apesar de ser uma entidade conhecida, existe uma heterogeneidade clinica e evolução diferentes, devendo ser considerada se Ck elevadas, RMcerebral normal e musculo miopático ou distrófico mesmo que ainda não apresentem espinha rígida.
    2012-12-07Documento de conferência Acesso aberto Ver mais
  • Expanding the MTM1 mutational spectrum: novel variants including the first multi-exonic duplication and development of a locus-specific database
    Publication . Oliveira, Jorge; Oliveira, Márcia E.; Kress, Wolfram; Taipa, Ricardo; Melo Pires, Manuel; Hilbert, Pascale; Baxter, Peter; Santos, Manuela; Buermans, Henk; den Dunnen, Johan; Santos, Rosário
    Myotubular myopathy (MIM#310400), the X-linked form of Centronuclear myopathy (CNM) is mainly characterized by neonatal hypotonia and inability to maintain unassisted respiration. The MTM1 gene, responsible for this disease, encodes myotubularin – a lipidic phosphatase involved in vesicle trafficking regulation and maturation. Recently, it was shown that myotubularin interacts with desmin, being a major regulator of intermediate filaments. We report the development of a locus-specific database for MTM1 using the Leiden Open Variation database software (http://www.lovd.nl/MTM1), with data collated for 474 mutations identified in 472 patients (by June 2012). Among the entries are a total of 25 new mutations, including a large deletion encompassing introns 2–15. During database implementation it was noticed that no large duplications had been reported. We tested a group of eight uncharacterized CNM patients for this specific type of mutation, by multiple ligation-dependent probe amplification (MLPA) analysis. A large duplication spanning exons 1–5 was identified in a boy with a mild phenotype, with results pointing toward possible somatic mosaicism. Further characterization revealed that this duplication causes an in-frame deletion at the mRNA level (r.343_444del). Results obtained with a next generation sequencing approach suggested that the duplication extends into the neighboring MAMLD1 gene and subsequent cDNA analysis detected the presence of a MTM1/MAMLD1 fusion transcript. A complex rearrangement involving the duplication of exon 10 has since been reported, with detection also enabled by MLPA analysis. It is thus conceivable that large duplications in MTM1 may account for a number of CNM cases that have remained genetically unresolved.
    2012-09-12Artigo científico Acesso restrito Ver mais
  • Expanding the mutation spectrum of the MTM1 gene: the first multi-exonic duplication and establishment of the MTM1 locus-specific database
    Publication . Oliveira, Jorge; Oliveira, Márcia E.; Brekelmans, Roel; Melo-Pires, Manuel; Guimarães, António; den Dunnen, Johan; Santos, Manuela; Santos, Rosário
    Centronuclear myopathies (CNM) are a group of diseases with variable onset and severity sharing as a distinctive histological feature, a high frequency of muscle fibers with centralized nuclei. Myotubular myopathy (MIM#310400) the X-linked form of CNM is characterized by neonatal hypotonia and inability to maintain unassisted respiration. The MTM1 gene, responsible for this disease, encodes myotubularin, a protein involved in myofiber differentiation and muscle cell architecture. In this work, eight patients were subjected to MTM1 MLPA analysis, selected according to the following criteria: (i) muscle biopsy compatible with CNM and (ii) exclusion of MTM1 point mutations by sequencing. We identified the first gross duplication spanning exons 1–5 (c.-76-?_342+?dup) in a 7 year old boy with progressive tetraparesis, ophtalmoparesis, facial diparesis and independent ambulation, the clinical course being milder than the classical myotubular myopathies. Analysis at the mRNA level revealed both normal transcripts and a mutated isoform lacking exon 6 (r.343_444del), suggesting somatic mosaicism. As suspected, this duplication was not detected in the patient’s mother. Considering the phenotypic expression in the patient, this mutational event most likely occurred de novo during early embryogenesis. We also describe the implementation of a locus-specific database (LSDB) for this gene using the Leiden Open Variation database (LOVD) software. The MTM1-LOVD (http://www.lovd.nl/MTM1) contains 372 mutation entries identified in 370 patients (last accessed March 2011). A total of 223 unique MTM1 mutations are listed in this LSDB, including: 207 point mutations, 15 single or multi-exonic deletions and the large duplication described in the present work. Despite the significant advances in this field during the last decade about one third of the CNM cases remain genetically unresolved. Here we show that gross MTM1 gene duplications may account for a fraction of these cases.
    2011Documento de conferência Acesso aberto Ver mais
  • Molecular profile of 307 Portuguese patients with dystrophinopathy, including thirty-nine new variants
    Publication . Gonçalves, Ana Rita; Santos, Rosário; Vieira, Emília; Vieira, José Pedro; Fineza, Isabel; Moreno, Teresa; Santos, Manuela; Bronze-da-Rocha, Elsa
    Mutations in the dystrophin gene (DMD) give rise to the allelic Duchenne or Becker muscular dystrophies. Besides providing a differential diagnosis for adequate clinical follow-up and management, the molecular characterization of these patients is becoming increasingly important in light of the recent and promising mutation-based therapeutic approaches. Due to the size and complexity of DMD, as well as the diversity of mutation types, molecular analysis requires a combination of techniques that enable the detection of gross deletions, duplications and the more subtle point mutations. In the course of our diagnostic service provided on a national basis, a total of 307 patients, representing 282 unrelated families, have been characterized at the molecular level. We identified 174 different mutations, where the distribution according to type was found to be in agreement with that reported in the literature for large cohorts. Also as expected, approximately 1/3 of the cases were shown to be de novo occurrences, as ascertained among the “sporadic” cases (25/82). These neo-mutations were comprised by 18% deletions, 6% duplications and 6% point mutations. We describe a total of thirty-nine undocumented variants, three of which were detected in obligate carrier female relatives of deceased patients. These new variants include 9 gross deletions, 8 gross duplications and 22 smaller mutations (deletions, duplications, delins rearrangements and nonsense or splice-site substitutions). Comprehensive analysis often involved expression studies at the mRNA level to help delineate breakpoint junctions, to identify altered splicing and ultimately to provide an explanation for apparent exceptions to the reading frame rule. This detailed molecular characterization is also important for the purpose of including our patients in the DMD National Registry, which will be articulated with the TREAT-NMD Global Database
    2011-09Documento de conferência Acesso aberto Ver mais