Percorrer por autor "Ramos, Ana"
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- Acrilamida em doçaria PortuguesaPublication . Jesus, Susana; Delgado, Inês; Ramos, Ana; Brandão, Carlos; Félix, Nelson; Castanheira, IsabelA acrilamida é um composto de estrutura vinílica, com propriedades carcinogénicas (Grupo 2A- IARC) que tem vindo a ser identificado, em alimentos processados, desde 2002. Segundo os últimos documentos publicados pela EFSA deve ser prioritário a determinação do teor de acrilamida em produtos de panificação e pastelaria. Este estudo teve como objetivo a determinação da quantidade de acrilamida em doçaria portuguesa. Trinta amostras de doces e pão fabricados em estabelecimentos hoteleiros do Norte, Centro e Sul do País, foram analisadas individualmente por UPLC-MS para quantificação do teor de acrilamida. Os resultados revelaram que de todas as amostras, os biscoitos de caramelo (110 µg/Kg), os biscoitos apertados (218.8 µg/Kg) e os biscoitos gregos (354.9 µg/Kg) são os que não excedem o valor indicativo da EFSA (500 µg/Kg). Quanto às amostras de tortas (686-1084 µg/Kg), pão de deus (994.5 µg/Kg), pastéis (526.7 – 809 µg/Kg) e queques (676 – 1057.7 µg/Kg) verificou-se que contêm maior quantidade de acrilamida quando comparado com o valor encontrado na literatura. No pão de trigo analisado e correspondente a uma receita nacional foi determinado um teor de acrilamida inferior a 600 µg/Kg. Perante os resultados obtidos, podemos inferir que a formação da acrilamida está relacionada com a receita seguida na confeção dos produtos, já que a temperatura de cozedura das massas foi superior a 120 °C. Os resultados analíticos encontrados aconselham à sua combinação com dados de consumo destes alimentos com vista à análise rigorosa da exposição a este contaminante por parte dos consumidores.
- Contribution of metrology on determination of acrylamide in foodstuffsPublication . André, Catarina; Delgado, Inês; Jesus, Susana; Ramos, Ana; Brandão, Carlos; Félix, Nelson; Castanheira, IsabelThe aim of this study was the determination of acrylamide in food with high consumed in Portugal. Samples were bought randomly from local supermarkets and from Escola Superior de Hotelaria e Turismo do Estoril. Sample preparation involved SPE (Solid Phase Extraction). Two chromatographic methods were developed, UPLC-PDA and UPLC-MS/MS which was more suitable and quantify unequivocally acrylamide. The acrylamide content in bread and pastries samples analyzed were above the indicative values published by EFSA.
- Determinação do conteúdo fenólico total e atividade antioxidante em arroz branqueado, farelo e casca de arrozPublication . André, Catarina; Delgado, Inês; Rego, Andreia; Mota, Carla; Ramos, AnaNeste trabalho pretende-se estudar a atividade antioxidante e determinar os compostos fenólicos totais da casca, farelo e arroz. Estes produtos contêm compostos antioxidantes e será uma mais-valia saber se a casca ou o farelo, produtos que são usualmente destruídos, contêm compostos interessantes a serem extraídos e utilizados noutras indústrias. No caso da casca e do farelo estes antioxidantes estão associados ao sistema natural de defesa da planta. Foi utilizada a extração sólido – líquido para os compostos bioativos. Esta extração foi previamente otimizada para o melhor rendimento. A cada um dos produtos em estudo adicionou-se uma solução de metanol:água 80:20 que ficou 24 horas a 30°C numa estufa com agitação. O conteúdo fenólico total foi determinado através do método de Folin-Ciocalteu. Este é um método colorimétrico cuja absorvância foi lida a 765nm. Foi feita uma curva de calibração com ácido gálico e as amostras foram incubadas durante 45 minutos. Os resultados são expressos em mg de equivalentes de ácido gálico por g de extrato. A capacidade antioxidante foi analisada através da eliminação de radicais livres de DPPH•, propriedade dos compostos antioxidantes. Foram feitas misturas e guardadas na ausência de luz durante 1 hora. A absorvância de cada solução foi medida a 517nm. Os resultados foram obtidos traçando um gráfico concentração de extrato vs radicais livres de DPPH• de modo a obter a quantidade de antioxidante necessária para reduzir a quantidade inicial de DPPH• a 50% (EC50). Os resultados para a extração metanólica estão em concordância com a literatura. A extração e a purificação dos compostos bioativos e compostos antioxidantes da casca e farelo de arroz é um meio potencial para a valorização destes resíduos.
- Translational switch during integrated stress response: the examples of p53 and UPF1Publication . Lacerda, Rafaela; Pereira, Bruna; Menezes, Juliane; Ramos, Ana; Neves, Ana Rita; Candeias, Marco M; Romão, LuísaThe scanning model for eukaryotic mRNA translation initiation states that the small ribosomal subunit, along with initiation factors, binds to the cap structure at the 5’ end of the mRNA and scans the 5’ untranslated region (5’UTR) until an initiation codon is found. However, when cells are exposed to stress stimuli, cap-dependent translation is inhibited, while the synthesis of some proteins is maintained by alternative mechanisms of translation initiation, which are vital for cell survival and stress recovery. Here we show two examples in which a translational switch occurs during integrated stress response (ISR). In the first case, tumor suppressor p53, we show that the ISR leads to the specific induction of a shorter p53 isoform (Δ160p53 isoform). This induction is dependent on translation elongation but does not require the eIF4E-eIF4G interaction. Studies using bicistronic constructs with wild-type Δ160p53 or reporter genes confirmed the presence of an Internal Ribosome Entry Site (IRES) in p53 mRNA, being eIF2α phosphorylation a key event leading to cap-independent expression of Δ160p53 during ISR. Interestingly, cancer-specific mutations in p53 also enhance cap-independent translation of Δ160p53 via Δ160p53IRES. Our data support a model in which an IRES structure in the coding region of p53, and the cancer-specific mutations that affect this structure, control p53 oncogenic functions by regulating Δ160p53 protein expression. A better understanding of Δ160p53IRES structure and function may be advantageous for a more efficient therapeutic targeting of p53. Human up-frameshift 1 (UPF1) is a key-protein involved in nonsense-mediated mRNA decay, telomere replication and homeostasis, and cell cycle progression. These crucial UPF1 functions suggest its tight gene expression regulation. Indeed, our results show that UPF1 5’UTR is able to mediate cap-independent translation in a bicistronic luciferase vector expressed in cervical and colorectal cancer cell lines. Such activity is maintained under endoplasmic reticulum stress. Interestingly, we found that the UPF1 5’UTR IRES function is inhibited when the first 100 nucleotides, or the last 125, are absent or altered. Understanding these IRESs mechanism of function and their biological relevance might provide tools for developing new therapies for human diseases such as cancer.
