Determinação de cianocobalamina (vitamina B12) em fórmulas infantis por UPLC-MS/MS

Mota, Carla; André, Catarina; Santos, Mariana; Castanheira, Isabel

http://hdl.handle.net/10400.18/2461

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A vitamina B12 (cobalamina) é essencial para o metabolismo celular, principalmente do sistema gastrointestinal, medula óssea e tecido nervoso sendo essencial na síntese de ácidos nucleicos. A carência de vitamina B12 é responsável pelo aparecimento de anemias. Outra das consequências desta carência é a desmielinização da medula provocando danos irreversíveis no sistema nervoso. A Cianocobalamina é utilizada na fortificação de fórmulas infantis com teores variáveis. Pela complexidade da matriz e estabilidade da vitamina o seu doseamento levanta preocupações. O método de UPLC-MS/MS precedido de uma extração em fase sólida (SPE) permite de forma rápida, eficiente e com baixos limites de quantificação, determinar o teor de cianocobalamina em fórmulas infantis. As amostras foram dissolvidas em 25 mL de uma solução de ácido fosfórico 4% com adição de 100 μL de uma solução 1 μg/mL de metotrexato como padrão interno. Esta suspensão é sonicada durante 10 minutos e centrifugada durante 15 minutos a 3400 rpm. Colocou-se 3 mL do sobrenadante numa coluna Oasis HLB da Waters, previamente condicionada com 3 mL de metanol e equilibrada com 3 mL de água. A eluição foi efetuada com metanol posteriormente evaporado à secura sob corrente de azoto. O resíduo foi reconstituído em 1 mL da primeira linha do gradiente da fase móvel, filtrado por filtro de seringa GHP 0,22 μm e injetado no cromatógrafo. O cromatógrafo utilizado foi um AcQuity UPLC com deteção por espectrometria de massa num triplo quadrupolo.Este método permitiu determinar a Vitamina B12, expressa em cianocobalamina, em fórmulas infantis. O limite de deteção do método é 0,248 μg/L. Obteve-se boas recuperações do padrão interno entre 95 e 105%. Os resultados obtidos para as fórmulas infantis foram de 0,702 μg/100g e de 1,983 μg/100g demonstrando a variabilidade que se pode encontrar nas diferentes formulações infantis.

Description

Abstract "Determinação de cianocobalamina (vitamina B12) em fórmulas infantis por UPLC-MS/MS”. In: Book of Abstracts do 12th Meeting on Food Chemistry – Bridging traditional and novel foods: composition, structure and functionality. (ref.: S9-PP11).