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- Implementação do método analítico para determinação de aminas biogénicas em amostras de pescado e produtos de pesca: avaliação de processos para a sua formaçãoPublication . Pereira, Inês Santos; Leitão, Ana; Motta, CarlaCom este trabalho pretende-se implementar um método para a determinação e quantificação simultânea de cinco aminas biogénicas, histamina, putrescina, cadaverina, tiramina e triptamina em amostras de atum fresco, atum em conserva e camarão congelado. Foram simultaneamente efetuados ensaios de contagem e identificação bacteriológica, de forma a aferir a existência de relação entre a concentração de aminas e a carga microbiana presente na matriz. A metodologia analítica inclui uma extração das aminas com ácido tricloroacético 5% (m/v). A separação e a quantificação dos analítos foi efetuada por cromatografia líquida de ultra eficiência, com detetor de díodos. Para garantir os parâmetros de qualidade do método foram avaliados, gama de trabalho, linearidade, limite de deteção, limite de quantificação, recuperação e precisão. Nas amostras em conserva as concentrações máximas de histamina, putrescina e cadaverina quantificadas foram 521,0 ± 43,1 mg/kg; 2844 ± 32 mg/kg e 52,80 ± 3,56 mg/kg, respetivamente. Nas amostras de atum fresco após 120 horas a 3±2ºC foram determinadas as concentrações máximas 1544 ± 83 mg/kg para a histamina, 2602 ± 709 mg/kg para a putrescina e 1044 ± 72 mg/kg para a cadaverina. No camarão as concentrações máximas atingidas foram 3790 ± 67 mg/kg para a histamina, 2498 ± 450 mg/kg para a putrescina e de 578,0 ± 135,0 mg/kg para cadaverina. As aminas tiramina e triptamina não foram detetadas nas matrizes analisadas. Nos ensaios de identificação microbiológica destacam-se as estirpes Pseudomonas fluorescens, Serratia liquefaciens Morganella morganii, Hafnia alvei, Staphylococcus epidermidis, Citrobacter freundii e Shewanella putrefaciens, conhecidas como produtoras de aminas, especialmente histamina. O método revelou-se adequado à quantificação dos analitos em estudo. Das 12 amostras analisadas, 8 revelaram valores de histamina superiores aos valores máximos legislados. As condições de conservação evidenciaram, no atum fresco e no camarão, poder influenciar o desenvolvimento de microrganismos e consequentemente o aumento das aminas biogénicas.
- First Case of Tularemia Reported in Portugal: Probably of Imported OriginPublication . Lopes de Carvalho, I.; Nascimento, P.; Núncio, M.S.; Rico, M.T.Tularemia is a zoonotic disease caused by Francisella tularensis, a gram-negative, facultative intracellular bacterium. Typically, human and animal infections are caused by F. tularensis subspecies tularensis (type A) strains mainly in Canada and USA, and F. tularensis subspecies holarctica (type B) strains throughout the northern hemisphere, including Europe. Tularemia is a disease with epidemiological surveillance in Europe since 2003 (Decision 2000/96/EC). Despite being considered an uncommon disease, recent outbreaks have been reported in several countries, including Spain, France, Scandinavia, Balkans and Hungary, and sporadic cases in Austria, Italy and the United Kingdom. In spite offbeing a disease of compulsory declaration in Portugal since 2003, until now no human cases were reported. In Portugal, seroprevalence rate of high-risk population is 8.9% and F. tularensis subsp. holarctica was first detected in 2007 by molecular methods in a human sample. Since 1998, National Institute of Health has provided the laboratory diagnosis of this disease, following the occurrence of an epidemic outbreak in Spain. The authors report here the first case of ulceroglandular form of tularemia in Portugal, probably of imported origin.
- Sugar-based bactericides targeting phosphatidylethanolamine-enriched membranesPublication . Dias, Catarina; Pais, João P.; Nunes, Rafael; Blázquez-Sánchez, Maria-Teresa; Marquês, Joaquim T.; Almeida, Andreia F.; Serra, Patrícia; Xavier, Nuno M.; Vila-Viçosa, Diogo; Machuqueiro, Miguel; Viana, Ana S.; Martins, Alice; Santos, Maria S.; Pelerito, Ana; Dias, Ricardo; Tenreiro, Rogério; Oliveira, Maria C.; Contino, Marialessandra; Colabufo, Nicola A.; de Almeida, Rodrigo F.M.; Rauter, Amélia P.Anthrax is an infectious disease caused by Bacillus anthracis, a bioterrorism agent that develops resistance to clinically used antibiotics. Therefore, alternative mechanisms of action remain a challenge. Herein, we disclose deoxy glycosides responsible for specific carbohydrate-phospholipid interactions, causing phosphatidylethanolamine lamellar-to-inverted hexagonal phase transition and acting over B. anthracis and Bacillus cereus as potent and selective bactericides. Biological studies of the synthesized compound series differing in the anomeric atom, glycone configuration and deoxygenation pattern show that the latter is indeed a key modulator of efficacy and selectivity. Biomolecular simulations show no tendency to pore formation, whereas differential metabolomics and genomics rule out proteins as targets. Complete bacteria cell death in 10 min and cellular envelope disruption corroborate an effect over lipid polymorphism. Biophysical approaches show monolayer and bilayer reorganization with fast and high permeabilizing activity toward phosphatidylethanolamine membranes. Absence of bacterial resistance further supports this mechanism, triggering innovation on membrane-targeting antimicrobials.