Percorrer por autor "Teixeira, Sandrina"
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- Caracterização da reação alérgica às bagas goji (Lycium barbarum)Publication . Teixeira, Sandrina; Batista, Rita; Igrejas, GilbertoLycium barbarum pertence à família taxonómica Solanaceae, que engloba outros alimentos, tais como o tomate e a batata. Os frutos desta planta, conhecidos na Europa como bagas goji, são ricos em nutrientes e contêm elevado teor em compostos bioativos, benéficos para a saúde quando consumidas diariamente, sendo, por isso, muitas vezes apelidados de “superalimento”. As bagas goji não são uma novidade na alimentação apesar de terem sido introduzidas na alimentação da população ocidental há relativamente pouco tempo, tendo vindo a ser utilizadas, cada vez mais, devido às suas propriedades nutricionais. No entanto, o consumo de bagas goji poderá ter efeitos negativos, tais como, a interação com anticoagulantes, nomeadamente a Varfarina, e o desenvolvimento de reação alérgica. Esta última, está relacionada com a potencial alergenicidade de proteínas presente nas bagas goji. Pretendeu-se com este estudo, caracterizar o proteoma das bagas goji e contribuir para um melhor conhecimento das proteínas envolvidas na reação alérgica. Para tal, numa primeira fase procedeu-se à otimização do método de extração proteica das bagas goji e à separação das suas proteínas por eletroforese bibimensional em gel desnaturante de poliacrilamida (2D SDS-PAGE), seguida de espectrometria de massa (MS/MS) para identificação das mesmas. Numa segunda fase, o objetivo foi tentar averiguar quais das proteínas identificadas por MS/MS são potencialmente alergénicas. Assim, nesta fase, devido à inexistência comercial de plasmas de indivíduos com alergia reportada às bagas goji, inicialmente realizou-se um ensaio de Western blot com plasmas de indivíduos alérgicos à batata e ao tomate de forma a averiguar se estes indivíduos reagiriam também às bagas goji. Após confirmação deste facto, procedeu-se à separação das proteínas das bagas goji por 2D SDS-PAGE, seguida de Western blot, com os mesmos plasmas, para identificação das proteínas envolvidas na reação alérgica. Neste estudo, conseguiram-se identificar significativamente 101 dos 180 spots retirados do gel de poliacrilamida. Essas identificações corresponderam a 36 proteínas diferentes, das quais 12 correspondem a proteínas potencialmente envolvidas na reação alérgica às bagas goji, uma vez que se ligaram a imunoglobulinas de tipo E (IgE) existentes nos plasmas dos indivíduos testados. Dos 12 tipos de proteínas às quais os indivíduos reagiram somente 7 corresponderam a proteínas potencialmente alergénicas já reportadas na base de dados Allergome. A utilização do software AlgPred (software que permite avaliar a potencial alergenicidade de uma proteína com base na sua sequência), com recurso à ferramenta Hybrid viii approach, para os 101 spots com identificação significativa, previu que 40 identificações correspondiam a potenciais alergénios e 61 a proteínas previsivelmente não alergénicas. Por fim, dos 12 tipos de proteínas que se ligaram às IgE presentes nos plasmas dos indivíduos testados oito são previsivelmente alergénicas pelo software AlgPred. Destas oito apenas cinco correspondem a proteínas já existentes na base de dados Allergome.
- Goji berries superfood – contributions for the characterisation of proteome and IgE-binding proteinsPublication . Teixeira, Sandrina; Luis, Inês; Oliveira, M.; Abreu, Isabel; Batista, RitaGoji berries’ bioactive compounds, which allowed classifying them as superfruits, led to an enormous increase of its consumption in western countries. However, the potential risk of allergy is a concern. In this study, we aimed to characterise the proteome of goji berries (Lycium barbarum) and identify proteins with putative role in the allergic reaction (IgE-binding proteins). We firstly used twodimensional (2D) gel electrophoresis followed by mass spectrometry (MS) to characterise goji berries’ proteome, and then Immunoblot reactivity with plasma from tomato and potato (same botanical family, Solanaceae) allergic individuals was assessed to characterise goji berries IgE-binding proteins. An inhibition assay was further performed to evaluate cross-reactivity among potato, tomato and goji berries. We significantly identified 93 out of the 180 MS analysed spots, corresponding to 29 protein functions. From these, 11 could be identified as goji berries IgE-binding proteins. We further demonstratedcross-reactivity between goji berries, tomato and potato.
- Potencial alérgico do superalimento bagas gojiPublication . Teixeira, Sandrina; Luís, Inês M.; Oliveira, M. Margarida; Abreu, Isabel A.; Batista, RitaA classificação das bagas goji como superalimento, devido essencialmente à sua composição em compostos bioativos, levou a um enorme aumento do seu consumo nos países ocidentais. Apesar de todos os seus benefícios, as bagas goji comportam alguns riscos, nomeadamente o de alergia. Neste estudo pretendemos caracterizar as proteínas (proteoma) das bagas goji (Lycium barbarum) e identificar aquelas envolvidas na reação alérgica (aquelas que se ligam às imunoglobulinas de tipo E- IgE). Assim, primeiramente procedemos à separação das proteínas das bagas goji por eletroforese bidimensional em gel de poliacrilamida, seguida da sua identificação por espectrometria de massa. Subsequentemente, testámos a reatividade de indivíduos alérgicos ao tomate e batata (alimentos da mesma família das bagas goji, Solanaceae) contra as proteínas das bagas goji realizando para tal um ensaio de Western blot. Realizámos também um ensaio de inibição onde a reatividade cruzada entre as bagas goji e o tomate e a batata foi avaliada. Finalmente, caracterizámos as proteínas de ligação às IgE realizando para tal um ensaio de Western blot com plasmas de indivíduos alérgicos à batata e tomate, após separação das proteínas das bagas goji por eletroforese bidimensional em gel de poliacrilamida. Foram identificados por espectrometria de massa 93, dos 180, spots retirados do gel, correspondendo a 29 funções proteicas. Destas, 11 corresponderam a proteínas de ligação às IgE. Demonstrámos igualmente, neste estudo, existir reatividade cruzada entre as bagas goji, o tomate e a batata.
