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- Actividade antibacteriana de extractos de Planktothrix agardhii contra Staphylococcus aureusPublication . Menezes, Carina; Dias, ElsaA resistência de bactérias patogénicas à antibioterapia é um dos principais problemas de saúde pública, face à crescente ineficácia dos antibióticos no tratamento de doenças infeciosas. Assim, a pesquisa de novos antibióticos é um importante desafio da investigação em saúde. O potencial farmacológico de cianobactérias tem sido avaliado e descrito, mas, no entanto, ainda não há nenhum composto cianobacteriano que tenha sido aprovado pelas autoridades do medicamento como agente antibacteriano. Neste trabalho avaliámos a atividade de extratos de 40 estirpes de Planktothrix agardhii contra duas bactérias patogénicas: Klebsiella pneumonia e Staphylococus aureus. Para cada espécie bacteriana alvo usou-se uma estirpe de referência (ATCC) e uma estirpe clínica, isolada a partir de amostras de pacientes e estudadas no Laboratório de Resistência aos Antibióticos e Infeções Associadas aos Cuidados de Saúde. As estirpes de P. agardhii foram isoladas de albufeiras portuguesas e têm sido mantidas na coleção “Estela Sousa e Silva Algae Culture Collection” do Laboratório de Biologia e Ecotoxicologia. A biomassa de P. agardhii (200mg) foi extraída com metanol (70%, 10mL/100mg) overnight e sujeita a ciclos de sonicação. O metanol dos extratos foi evaporado e os extratos aquosos resultantes foram purificados em cartuchos C18. A atividade dos extratos contra as bactérias K. pneumonia e S.aureus foi avaliada através do método da Difusão em Disco (EUCAST), usando discos impregnados com 2, 4, 6, 8 e 10 mg de cada extrato. De acordo com os resultados preliminares, nenhum dos extratos apresenta atividade contra K. pneumonia, mas o extrato de P. agardhii LMECYA 256 apresenta um ligeiro halo de inibição relativamente às estirpes de S. aureus, de uma forma aparentemente dependente da dose de extrato aplicada. O S. aureus é uma bacteria Gram-positiva, frequentemente associada a uma vasta gama de patologias, desde simples infeções na pele, até infeções graves como pneumonia e meningite. Assim, revela-se do maior interesse explorar as propriedades antibacterianas de cianobactérias, designadamente do género Planktothrix, contribuindo, desta forma, para um dos desafios atuais da ciência: a identificação de novos antibióticos de origem natural.
- The response of aquatic heterotrophic bacteria to microcystins exposurePublication . Pinto, André; Miguéns, Diana; Valério, ElisabeteMicrocystins (MCs) are the class of hepatotoxins most commonly produced by cyanobacteria. These are found in aquatic ecosystems where they coexist with other microorganisms such as heterotrophic bacteria, which have a key role in biogeochemical processes, being essential to the management of the aquatic ecosystem, as they are the base of the trophic web. In this work we present and discuss the findings, obtained so far, about MCs effects on microbial cells that play an important role in the aquatic ecosystem.
- Sobrevivência de Cylindrospermopsis raciborskii ao tratamento de água para consumo humanoPublication . Menezes, Carina; Martins, Olga; Valério, Elisabete; Dias, ElsaA espécie Cylindrospermopsis raciborskii, considerada até há relativamente pouco tempo uma espécie tropical, apresenta actualmente uma distribuição mais global, designadamente em regiões temperadas. O sucesso desta espécie em colonizar diversos habitats parece estar relacionado com a sua tolerância a factores ambientais e a sua plasticidade fenotípica. Neste trabalho descrevemos a ocorrência de C. raciborskii na Albufeira do Roxo (Alentejo, Portugal) e a sua sobrevivência aos processos de tratamento de água para consumo humano.
- Resistência a antibióticos em cianobactériasPublication . Dias, Elsa; Oliveira, Micaela; Manageiro, Vera; Ferreira, Eugénia; Vasconcelos, Vitor; Caniça, ManuelaOs recursos hídricos constituem reservatórios de antibióticos e microrganismos resistentes, contribuindo, assim, para a disseminação de resistência a antibióticos entre bactérias ambientais e patogénicas. As cianobactérias (CB) são consideradas organismos sensíveis a antibióticos e, inclusivamente, são usadas como indicadores biológicos na avaliação de contaminantes hídricos. No entanto, a nossa equipa tem vindo a investigar o eventual papel das CB no resistoma hídrico e neste trabalho iremos apresentar as principais conclusões desse estudo. A avaliação do fenótipo de suscetibilidade a antibióticos revelou que todas as CB estudadas (28 estirpes de 5 espécies diferentes) apresentam suscetibilidade reduzida ao trimetoprim (TMP). Porém, não foram detetados genes de resistência a este antibiótico, por PCR/sequenciação. Colocámos a hipótese de que as CB têm resistência intrínseca ao TMP, provavelmente por usarem uma via metabólica alternativa à via da dihidrofolato redutase (folA), o alvo intracelular do TMP. De facto, a análise do genoma completo de uma das estirpes (Microcystis aeruginosa, LMECYA7) revelou a presença do gene que codifica a thymidylato synthase (ThyX), enzima alternativo à folA no metabolismo dos folatos nos procariotas. Por outro lado, o padrão de suscetibilidade a outros antibióticos depende da espécie e/ou do local de origem das CB. Destaca-se a menor suscetibilidade do género Planktothrix, o que sugere que as suas características estruturais, fisiológicas e bioquímicas lhes conferem uma maior resistência natural a alguns antibióticos, comparativamente a outros géneros. Foram detetados genes (strA-strB, sul1; qacΔE) e/ou integrões (int1-tipo) associados à resistência e/ou disseminação de alguns antibióticos em 60% das estirpes. A espécie P. mougeotii revelou uma suscetibilidade reduzida a um maior número de antibióticos e a maior percentagem de estirpes com genes de resistência (75%), comparativamente a M. aeruginosa (63%) e P. agardhii (38%). Estes resultados pressupõem a resistência adquirida no habitat, uma vez que as estirpes P. mougeotii foram isoladas numa Estação de Tratamento de Águas Residuais. Foram também isoladas bactérias ambientais associadas às estirpes de CB com padrão de (multi)resistência a várias classes de antibióticos. Estes resultados demonstram que o impacto da poluição antibiótica pode não só afetar as comunidades cianobacterianas e as suas funções ecológicas como, também, conferir-lhes um papel no resistoma hídrico.
- Cross-protection to new drifted influenza A(H3) viruses and prevalence of protective antibodies to seasonal influenza, during 2014 in PortugalPublication . Guiomar, Raquel; Pereira da Silva, Susana; Conde, Patrícia; Cristóvão, Paula; Maia, Ana Carina; Pechirra, Pedro; Rodrigues, Ana Paula; Nunes, Baltazar; Milho, Luís; Coelho, Ana Paula; Fernandes, Aida; Caseiro, Paula; Rodrigues, Fernando; Correia, Lurdes; Pereira-Vaz, João; Almeida, Sofia; Branquinho, Paula; Côrte-Real, Rita; Viseu, Regina; Peres, Maria João; Sanches, Raquel; Dantas, Filipa; Freitas, Ludovina; Andrade, Graça; Maurílio, Manuel; Caldeira, Filomena; Cabral Veloso, Rita; Mota-Vieira, Luísa; Soares, Marta; Couto, Ana Rita; Bruges-Armas, Jácome; Mouro Pinto, Rita; Sobrinho Simões, Joana; Costa, Maria do Rosário; Guimarães, João Tiago; Martins, Luís; Cunha, MárioIntroduction: Immune profile for influenza viruses is highly changeable over time. Serological studies can assess the prevalence of influenza, estimate the risk of infection, highlight asymptomatic infection rate and can also provide data on vaccine coverage. The aims of the study were to evaluate pre-existing cross-protection against influenza A(H3) drift viruses and to assess influenza immunity in the Portuguese population. Materials and methods: We developed a cross-sectional study based on a convenience sample of 626 sera collected during June 2014, covering all age groups, both gender and all administrative health regions of Portugal. Sera antibody titers for seasonal and new A(H3) drift influenza virus were evaluated by hemagglutination inhibition assay (HI). Seroprevalence to each seasonal influenza vaccine strain virus and to the new A(H3) drift circulating strain was estimated by age group, gender and region and compared with seasonal influenza-like illness (ILI) incidence rates before and after the study period. Results: Our findings suggest that seroprevalences of influenza A(H3) (39.9%; 95% CI: 36.2-43.8) and A(H1)pdm09 (29.7%; 95% CI: 26.3-33.4) antibodies were higher than for influenza B, in line with high ILI incidence rates for A(H3) followed by A(H1)pdm09, during 2013/2014 season. Low pre-existing cross-protection against new A(H3) drift viruses were observed in A(H3) seropositive individuals (46%). Both against influenza A(H1)pdm09 and A(H3) seroprotection was highest in younger than 14-years old. Protective antibodies against influenza B were highest in those older than 65 years old, especially for B/ Yamagata lineage, 33.3% (95% CI: 25.7-41.9). Women showed a high seroprevalence to influenza, although without statistical significance, when compared to men. A significant decreasing trend in seroprotection from north to south regions of Portugal mainland was observed. Conclusions: Our results emphasize that low seroprotection increases the risk of influenza infection in the following winter season. Seroepidemiological studies can inform policy makers on the need for vaccination and additional preventive measures.
