Browsing by Author "Hagenfeldt, Manuela"
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- Effects of occupational exposure to tobacco smoke: is there a link between environmental exposure and disease?Publication . Pacheco, Solange A.; Torres, Vukosava M.; Louro, Henriqueta; Gomes, Filomena; Lopes, Carlos; Marçal, Nelson; Fragoso, Elsa; Martins, Carla; Oliveira, Cátia L.; Hagenfeldt, Manuela; Bugalho-Almeida, António; Penque, Deborah; Simões, TâniaIn a previous study, evidence was provided that indoor secondhand tobacco smoke (SHS) air pollution remains high in Lisbon restaurants where smoking is allowed, regardless of the protective measures used. The aim of this study was to determine in these locations the levels of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAH) associated with the particulate phase of SHS (PPAH), a fraction that contains recognized carginogens, such as benzo[a]pyrene (BaP). Data showed that restaurant smoking areas might contain PPAH levels as high as 110 ng/m(3), a value significantly higher than that estimated for nonsmoking areas (30 ng/m(3)) or smoke-free restaurants (22 ng/m(3)). The effective exposure to SHS components in restaurant smoking rooms was confirmed as cotinine levels found in workers' urine. Considering that all workers exhibited normal lung function, eventual molecular changes in blood that might be associated with occupational exposure to SHS and SHS-associated PPAH were investigated by measurement of two oxidative markers, total antioxidant status (TAS) and 8-hydroxyguanosine (8-OHdG) in plasma and serum, respectively. SHS-exposed workers exhibited higher mean levels of serum 8-OHdG than nonexposed workers, regardless of smoking status. By using a proteomics approach based on 2D-DIGE-MS, it was possible to identify nine differentially expressed proteins in the plasma of SHS-exposed nonsmoker workers. Two acute-phase inflammation proteins, ceruloplasmin and inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain 4 (ITIH4), were predominant. These two proteins presented a high number of isoforms modulated by SHS exposure with the high-molecular-weight (high-MW) isoforms decreased in abundance while low-MW isoforms were increased in abundance. Whether these expression profiles are due to (1) a specific proteolytic cleavage, (2) a change on protein stability, or (3) alterations on post-translational modification pattern of these proteins remains to be investigated. Considering that these events seem to precede the first symptoms of tobacco-related diseases, our findings might contribute to elucidation of early SHS-induced pathogenic mechanisms and constitute a useful tool for monitoring the effects of SHS on occupationally exposed individuals such as those working in the hospitality industry.
- Utilidade da Proteómica na Compreensão da Patogenia Molecular Proximal da Doença Cerebral AlcoólicaPublication . Peneda, Jorge; Charro, Nuno; L. Hood, Brian; Fonseca, Aidil; Hagenfeldt, Manuela; Miranda, Armandina; Zerimech, Farid; Gomes, Filomena; Neto, Domingos; P. Conrads, Thomas; Faria, Daniel; M Couto, Francisco; Penque, DeborahO avanço técnico instrumental no estudo da Proteómica permite aprofundar a interpretação da patogenia molecular de múltiplas doenças. Na doença degenerativa cerebral o mecanismo patogénico inflamatório crónico e imunológico tem sido consensual como será o caso deste órgão alvo preferencial estrutural e funcional em circuitos neuronais susceptíveis na doença alcoólica crónica. A perda da quiescência da impermeabilidade da barreira hemato-encefálica na doença alcoólica, torna acessível o estudo de marcadores moleculares proteicos no sangue periférico, com o apoio da bioinformática e cuidado escrutínio abrangente bibliográfico de proteínas selectivas individuais explícitas e, implícitas intervenientes directas/indirectas na disfunção bioquímica da nevróglia (glicose) e da transmissão neural. Objectivo: Valorização interpretativa no comportamento do complexo perfil proteómico electivo na patogenia molecular da doença cerebral sob efeito pró imunoinflamatório sistémico do metabolismo do etanol e endotoxémia na doença cerebral alcoólica (DCA). Material e métodos: Estudo longitudinal de 27 doentes com alcoolismo crónico activo (T0) e valorização comparativa com abstinência controlada (T1) terapêutica, psicologia de grupo e dieta standardizada em dois subgrupos: (A n=17) com elevados níveis relativos de indicadores de stresse oxidativo/nítrico versus (B n=10) com baixos níveis destes indicadores. Métodos laboratoriais – proteómica e bioquímica descrita pelos autores em 4th EuPA Scientific Meeting, A Proteomics Odyssey Towards Next Decades, Estoril, Portugal, October 23-27 2010:110 111. Resultados Sintéticos: Frequência de rácios A/B: 54.2% de 354 proteínas totais descriminadas têm influência directa/indirecta no SNC. Do total, 51.8% aumentadas e 53.1% diminuídas. Evolução de rácios sob abstinência em cada grupo: AT0/AT1 de 146 proteínas 40.4% diminuídas e 59.6% aumentadas; BT0/BT1 de 130 proteínas 50.8% diminuídas e 49.2% aumentadas; e ainda valorização funcional descriminada de proteínas individuais do total de 340. Conclusões: O stresse oxidativo/nítrico altera o perfil proteómico quantitativo e qualitativo sob consumo activo com indiciadores moleculares múltiplos para um estado global pró-inflamatório e pró-apoptoico (glicose e degenerescência neural). A reversibilidade clínica parcial é acompanhada por variações evolutivas quantitativas e qualitativas do perfil proteómico o que permite valorizar a importância do stresse oxidativo/nítrico como indução patogénica molecular proximal na degenerescência da (DCA).